[发明专利]一种荧光检测次氯酸的方法

摘要

本发明提供了一种荧光检测次氯酸的方法，将市售的7‑(二乙氨基)‑2‑氧代‑2H‑色烯‑3‑甲醛(7‑(diethylamino)‑2‑oxo‑2H‑chromene‑3‑carbaldehyde)作为检测ClO^‑的一种荧光试剂，在pH为7.4的PBS缓冲溶液中，利用ClO^‑的氧化性，将化合物中醛基氧化成羧基来定量地检测ClO^‑的含量。这种检测方法灵敏度高，检测限低，检测过程简便。

主权项

1.一种荧光检测ClO^‑的方法，其特征在于，步骤为：(1)配制溶液：配制pH＝7.4、浓度为10mM的PBS缓冲溶液；用DMSO配制2mM的7‑(二乙氨基)‑2‑氧代‑2H‑色烯‑3‑甲醛探针溶液；用去离子水配制浓度为13.4mM的ClO^‑溶液；(2)按体积比2000:10，分别将2000μL pH 7.4的PBS缓冲溶液和10μL 2mM7‑(二乙氨基)‑2‑氧代‑2H‑色烯‑3‑甲醛的DMSO溶液加到荧光比色皿中，在荧光分光光度仪上检测，随着不同浓度的ClO^‑加入，484nm的荧光强度逐渐减弱；(3)分别将2000μL pH 7.4的PBS缓冲溶液和10μL 2mM7‑(二乙氨基)‑2‑氧代‑2H‑色烯‑3‑甲醛的DMSO溶液加到另外的荧光比色皿中，分别再加入不同体积的13.4mM ClO^‑溶液：0、0.3、0.6、1.1、1.6、2.1、2.6、3.1、3.6、4.1、4.6、5.1、5.6μL，在荧光分光光度仪上测定484nm对应的荧光强度F：3134、3059、3007、2961、2841、2720、2547、2473、2367、2276、2088、1915、1810，以ClO^‑浓度为横坐标，以相对荧光强度F₀‑F为纵坐标绘制图，F₀＝3134，得到ClO^‑浓度的工作曲线，线性回归方程为：F₀‑F＝35.170c‑41.684，c的单位为μM，测量时的激发波长为289nm；(4)2000μL pH 7.4的PBS溶液和10μL 2mM7‑(二乙氨基)‑2‑氧代‑2H‑色烯‑3‑甲醛的DMSO溶液加到干净的荧光比色皿中，用微量进样器吸取V ul待测样品溶液，加入到此荧光比色皿中，在荧光分光光度仪上检测，将测得的荧光强度代入步骤(3)的线性回归方程，得到浓度c，待测样品C_待测样＝2000uL×c×10^‑6/VuL,即可求得NaClO的浓度。