[发明专利]一种提高极低拷贝数目标DNA检测灵敏度的方法在审
申请号: | 201710012297.7 | 申请日: | 2017-01-09 |
公开(公告)号: | CN106755455A | 公开(公告)日: | 2017-05-31 |
发明(设计)人: | 梁兴国;潘孝明;王鹏飞 | 申请(专利权)人: | 青岛千卓分子生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 青岛中天汇智知识产权代理有限公司37241 | 代理人: | 赵翠 |
地址: | 266000 山东省青岛市高新*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明涉及一种提高极低拷贝数目标DNA检测灵敏度的方法,主要步骤如下向待检测样品DNA中加入外源背景基因组DNA;使用特定的可以对目标DNA切割产生随机碱基粘性末端的限制性内切酶对混合后的样品DNA进行酶切;根据目标DNA切割后所产生的粘性末端设计与之互补的接头并与之进行连接;使用接头中含有的通用引物对连接产物进行PCR反应;以PCR产物为模板,使用针对目标DNA设计的特异性引物进行特异性核酸扩增检测。本方法适用性广,可有效提高数量极低的病毒、真菌、细菌等目标DNA的检测灵敏度,方法设计灵活,操作简便成本较低,具有显著的实际应用意义。 | ||
搜索关键词: | 一种 提高 拷贝 目标 dna 检测 灵敏度 方法 | ||
【主权项】:
一种提高极低拷贝数目标DNA检测灵敏度的方法,其特征在于,主要步骤如下:向待检测样品DNA中加入外源背景基因组DNA;使用特定的可以对目标DNA切割产生随机碱基粘性末端的限制性内切酶对混合后的样品DNA进行酶切;根据目标DNA切割后所产生的粘性末端设计与之互补的接头并与之进行连接;使用接头中含有的通用引物对连接产物进行PCR反应;以PCR产物为模板,使用针对目标DNA设计的特异性引物进行特异性核酸扩增检测。
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