[发明专利]一种制备鲑鱼降钙素的方法有效
| 申请号： | 201710015213.5 | 申请日： | 2017-01-10 |
| 公开（公告）号： | CN107699588B | 公开（公告）日： | 2020-05-08 |
| 发明（设计）人： | 刘昱辉;李梅;贾士荣;王志兴 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院生物技术研究所 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;C12N15/62;C07K14/585 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅;何叶喧 |
| 地址： | 100081 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种制备鲑鱼降钙素的方法。本发明所提供的方法，依次包括如下步骤：(1)将含有表达盒的重组载体导入受体植物，得到转基因植物；所述表达盒自上游至下游依次包括如下元件：植物种子特异表达蛋白基因的启动子、融合基因和终止序列；所述融合基因包括编码蛋白标签的区段丙、甲酸的识别序列和编码鲑鱼降钙素的前体的核酸分子；(2)取转基因植物的种子，脱脂后提取粗蛋白；(3)利用所述蛋白标签从所述油体中纯化所述融合蛋白；(4)用甲酸进行切割；(5)分离鲑鱼降钙素；(6)醋酸化；(7)脱盐。实验证明，采用本发明所提供的方法可以得到生物学活性较高的鲑鱼降钙素。因此，本发明提供的方法具有重要的应用价值。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 制备 鲑鱼 降钙素 方法 | ||
【主权项】：
一种制备鲑鱼降钙素的方法，依次包括如下步骤：(1)将含有表达盒的重组载体导入受体植物，得到转基因植物；转基因植物中表达融合蛋白；所述表达盒自上游至下游依次包括如下元件：植物种子特异表达蛋白基因的启动子、融合基因和终止序列；所述融合基因中含有区段丙、区段丁和区段乙；所述区段丙编码蛋白标签；所述区段丁为切割物质的识别序列；所述区段乙编码鲑鱼降钙素的前体；所述鲑鱼降钙素的前体为氨基酸序列如序列表中序列5自N末端起第158至190位所示的蛋白质；(2)取转基因植物的种子，脱脂后提取粗蛋白；(3)利用所述蛋白标签从所述粗蛋白中纯化所述融合蛋白；(4)取步骤(3)得到的融合蛋白，用切割物质进行切割；(5)从步骤(4)的产物中分离鲑鱼降钙素；(6)醋酸化；(7)脱盐。
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