[发明专利]一种用于T细胞白血病微小残留病检测的方法

摘要

本发明公开了一种用于T细胞白血病微小残留病检测的方法，包括多重PCR引物，所述多重PCR引物包括上游引物和下游引物，所述上游引物为SEQ ID N081～SEQ ID N0112序列组成的上游引物组；所述下游引物为SEQ ID N0114核苷酸序列组成的；检测方法包括以下步骤S1，提取人外周血单个核细胞获得总RNA；S2，将获得的RNA采用一步RT‑PCR的方法，进行多重PCR反应，获得多重PCR产物；S3，多重PCR反应结束后，磁珠纯化PCR产物，除去多余的引物；S4，在纯化后的多重PCR产物的3’末端添加碱基A，获得具有3’粘性末端A的PCR产物；S5，将具有3’粘性末端A的PCR产物与接头序列相连，获得含接头的连接产物。本发明提供了一种T细胞白血病微小残留病检测方法，提高了检测效率，适合推广。

主权项

一种用于T细胞白血病微小残留病检测的方法，其特征在于，包括多重PCR引物，所述多重PCR引物包括上游引物和下游引物，所述上游引物为SEQ ID N0:81～SEQ ID N0:112序列组成的上游引物组；所述下游引物为SEQ ID N0:114核苷酸序列组成的；检测方法包括以下步骤：S1，提取人外周血单个核细胞获得总RNA；S2，将获得的RNA采用一步RT‑PCR的方法，进行多重PCR反应，获得多重PCR产物；S3，多重PCR反应结束后，磁珠纯化PCR产物，除去多余的引物；S4，在纯化后的多重PCR产物的3’末端添加碱基A，获得具有3’粘性末端A的PCR产物；S5，将具有3’粘性末端A的PCR产物与接头序列相连，获得含接头的连接产物；S6，对含接头的连接产物用测序引物进行PCR扩增，获得扩增产物，纯化，定量，测序检测。