[发明专利]一种ECH1自身抗体的筛选和鉴定方法及其应用有效
申请号: | 201710017238.9 | 申请日: | 2017-01-10 |
公开(公告)号: | CN106680503B | 公开(公告)日: | 2018-05-04 |
发明(设计)人: | 代丽萍;王晓;李记天;张建营 | 申请(专利权)人: | 河南省医药科学研究院 |
主分类号: | G01N33/574 | 分类号: | G01N33/574 |
代理公司: | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙)11350 | 代理人: | 汤东凤 |
地址: | 450052 河*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | 本发明公开了一种在ECH1自身抗体的筛选和鉴定方法及其应用,包括以下步骤通过肺癌细胞系H1299全蛋白提取物进行双向电泳,与5例肺癌患者血清和5例正常人血清进行蛋白印迹法,筛选有意义的肿瘤自身抗原,经过比对分析,仅出现在患者血清的蛋白点被进行进一步分析;SDS‑PAGE胶上的兴趣蛋白点经切割、消化后,采用LC‑MS/MS质谱分析方法对上述蛋白点进行分析,经检测鉴定为ECH1;进一步验证ECH1自身抗体能否作为肺癌诊断标志物。本发明研究发现应用ELISA方法进行血清ECH1自身抗体的检测,可以较准确地将肺癌患者和正常人,以及慢性肺病患者鉴别开来,并可以用于肺癌的早期诊断。 | ||
搜索关键词: | 一种 ech1 自身抗体 筛选 鉴定 方法 及其 应用 | ||
【主权项】:
一种ECH1自身抗体的筛选和鉴定方法,其特征在于,包括以下步骤:1)通过肺癌细胞系H1299全蛋白提取物进行双向电泳,与5例肺癌患者血清和5例正常人血清进行蛋白印迹法,筛选有意义的肿瘤自身抗原,经过比对分析,仅出现在患者血清的蛋白点被进行进一步分析;2)SDS‑PAGE胶上的兴趣蛋白点经切割、消化后,采用LC‑MS/MS质谱分析方法对上述蛋白点进行分析,经检测鉴定为ECH1;3)为进一步验证ECH1自身抗体能否作为肺癌诊断标志物,应用ELISA检测方法,对90例肺癌患者血清,90例慢性肺病患者血清,以及89例正常人血清进行ECH1自身抗体水平的检测;结果显示,ECH1自身抗体在肺癌患者血清中的表达水平高于慢性肺病患者和正常人血清,具有统计学意义。
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