[发明专利]一种高效抽提血清和血浆游离DNA的方法

摘要

本发明公开了一种高效抽提血清和血浆中游离DNA的方法，包括以下步骤1.将血清或血浆加入到离心管中作为样本；2.向步骤1的离心管中加入裂解液、核酸助沉剂和磁珠，漩涡混匀，室温放置5‑30min；3.将步骤2的离心管放置在磁力架上，待磁珠完全聚集后，完全吸出上清液；4.加入洗涤液至步骤3的离心管中，漩涡混匀，离心管放置在磁力架上，待磁珠完全聚集后，完全吸出上清液；5.向步骤4的离心管内加入洗脱液，漩涡混匀，室温放置2‑20min；6.将步骤5的离心管置于磁力架上，待磁珠完全聚集后，吸出上清液至另一新的离心管内，即得到纯化的游离DNA；能快速获取高质量的获取血清和血浆中的游离DNA，避免了现有的磁珠法和离心柱法进行游离DNA分离的繁琐步骤。

主权项

一种高效抽提血清和血浆中游离DNA的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将血清或血浆加入到离心管中作为样本；(2)向步骤(1)的离心管中加入裂解液、核酸助沉剂和磁珠，漩涡混匀，室温放置5‑30min；(3)将步骤(2)的离心管放置在磁力架上，待磁珠完全聚集后，完全吸出上清液；(4)加入洗涤液至步骤(3)的离心管中，漩涡混匀，离心管放置在磁力架上，待磁珠完全聚集后，完全吸出上清液；(5)向步骤(4)的离心管内加入洗脱液，漩涡混匀，室温放置2‑20min；(6)将步骤(5)的离心管置于磁力架上，待磁珠完全聚集后，吸出上清液至另一新的离心管内，即得到纯化的游离DNA；所述裂解液的成分为1‑6mol/L离液盐、20‑200mmol/L柠檬酸钠、5‑20mmol/L EDTA、10‑200mmol/L Tris‑HCl、0.2‑2.0％N‑月桂酰基肌氨酸钠、0‑20％非离子表面活性剂和20‑50％异戊醇，核酸助沉剂为poly A、carrier RNA、acyl carrier中的任意一种，洗涤液的成分为5‑20％PEG‑4000、5‑20mmol/L EDTA、10‑20mmol/L柠檬酸钠、10‑50mmol/L Tris‑HCl、0‑2.0％非离子表面活性剂和5‑20％甘油，洗脱液的成分为pH值为8.0的10mM Tris‑HCl，磁珠是粒径为0.1‑1μm的硅羟基磁珠，离液盐为离液序列高的盐，所述裂解液中的Tris‑HCl的pH为4.0‑8.0。