[发明专利]一种兔支气管败血波氏杆菌单因子血清在审
申请号: | 201710031666.7 | 申请日: | 2017-01-17 |
公开(公告)号: | CN106589119A | 公开(公告)日: | 2017-04-26 |
发明(设计)人: | 张恒;张会;范根成;杜元钊 | 申请(专利权)人: | 青岛易邦生物工程有限公司 |
主分类号: | C07K16/12 | 分类号: | C07K16/12;C07K16/06;C12N15/31;C12N15/70;C07K14/195;G01N33/569 |
代理公司: | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙)11350 | 代理人: | 汤东凤 |
地址: | 266009 山东省*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明提供的兔支气管败血波氏杆菌单因子血清,是通过对基因重组工程菌的诱导、超声破碎、融合蛋白纯化、定量,将纯化后的兔支气管败血波氏杆菌抗原蛋白与弗氏完全佐剂进行乳化制备出了兔支气管败血波氏杆菌基因工程重组亚单位疫苗;再将此疫苗强化免疫Balb/C小鼠,免疫结束后用QDBb01株进行攻毒,选择攻毒后无发病临床症状的健康小鼠采集血清制备成单因子血清抗体。本发明通过制备兔支气管败血波氏杆菌单因子血清抗体,将待检兔支气管败血波氏杆菌悬浮培养后,采用间接免疫荧光检测技术进行该菌悬浮状态下的一抗、二抗荧光抗体染色。该检测方法能够具体检测到兔支气管败血波氏杆菌的单个菌体,具有灵敏度高、特异性强和重复性好的特点。 | ||
搜索关键词: | 一种 支气管 败血 杆菌 因子 血清 | ||
【主权项】:
一种兔支气管败血波氏杆菌单因子血清,其特征在于,所述的单因子血清的制备方法如下:从兔支气管败血波氏杆菌QDBb01株基因组中PCR扩增出抗原蛋白PPP的编码基因,再将该编码基因通过PET32a(+)表达载体构建出能表达兔支气管败血波氏杆菌保护性蛋白PPP的大肠杆菌BL21重组基因工程菌,通过对基因重组工程菌的诱导、超声破碎、融合蛋白纯化、定量,将纯化后的兔支气管败血波氏杆菌抗原蛋白与弗氏完全佐剂进行乳化制备出了兔支气管败血波氏杆菌基因工程重组亚单位疫苗;再将此疫苗强化免疫Balb/C小鼠三次,每次间隔14d,免疫结束后用兔支气管败血波氏杆菌QDBb01株进行攻毒,选择攻毒后无发病临床症状的健康小鼠采集血清制备成单因子血清抗体。
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