[发明专利]一种Caco-2/HUVEC细胞共培养体系的构建在审
申请号: | 201710033394.4 | 申请日: | 2017-01-13 |
公开(公告)号: | CN107083364A | 公开(公告)日: | 2017-08-22 |
发明(设计)人: | 黄午阳;张钟元;闫征;吴寒;李大婧;刘春泉 | 申请(专利权)人: | 江苏省农业科学院 |
主分类号: | C12N5/09 | 分类号: | C12N5/09;C12N5/071 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 210014 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种Caco‑2和HUVEC细胞共培养体系的构建方法。将25~40代对数生长期Caco‑2细胞接种到Transwell板上层小室培养至细胞完全分化;将2~6代对数生长期HUVEC细胞接种到Transwell板下层小室培养至细胞长满80~90%;将分化完全的Caco‑2细胞Transwell上层小室插入到培养好的HUVEC细胞Transwell下层小室中,微调DMEM培养基,于37℃、5%CO2环境非接触共同培养。本发明构建的Caco‑2/HUVEC共培养体系可同时研究药物的吸收代谢和生理活性,模拟药物经肠道吸收代谢后在循环系统的药理作用,提供一种反映药物生物利用度的细胞模型。 | ||
搜索关键词: | 一种 caco huvec 细胞 培养 体系 构建 | ||
【主权项】:
一种Caco‑2/HUVEC细胞共培养体系的构建,其特征在于:将25~40代的Caco‑2细胞用DMEM培养基于37℃、5%CO2环境培养,将对数生长期Caco‑2细胞接种到Transwell板上层小室,培养至细胞完全分化;将2~6代的HUVEC细胞用DMEM培养基于37℃、5%CO2环境培养,将对数生长期HUVEC细胞接种到Transwell板下层小室,至细胞长满80~90%;将分化完全的Caco‑2细胞Transwell上层小室插入到培养好的HUVEC细胞Transwell下层小室中,微调整DMEM培养基(含10%胎牛血清、1%非必需氨基酸、1%谷氨酰胺、100μg/mL血管内皮细胞生长因子、2%青霉素‑链霉素双抗液,pH7.4),采用非接触式共培养,于37℃、5%CO2环境共同培养。
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