[发明专利]一种基于血清的ELISA标准品稀释液的制备方法有效
| 申请号： | 201710039375.2 | 申请日： | 2017-01-19 |
| 公开（公告）号： | CN106932563B | 公开（公告）日： | 2018-11-23 |
| 发明（设计）人： | 袁志波 | 申请（专利权）人： | 杭州联科生物技术股份有限公司 |
| 主分类号： | G01N33/531 | 分类号： | G01N33/531 |
| 代理公司： | 上海精晟知识产权代理有限公司 31253 | 代理人： | 冯子玲 |
| 地址： | 310015 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基于血清的ELISA标准品稀释液的制备方法，包括以下步骤，a.用缓冲液配制若干动物血清，血清浓度为5％‑95％，浓度梯度为5％，在各个浓度的动物血清中加入目标蛋白，取若干健康的人血清样本，加入目标蛋白，配制后目标蛋白浓度与动物血清中接近；b.对加入目标蛋白后的各个浓度的动物血清与人血清样本做常规ELISA实验操作；c.制作OD曲线：Excel表横轴为动物血清浓度，纵轴为OD值制作OD曲线；d.确定与人血清样本OD平均值相交的动物血清浓度，即人血清中目标蛋白在ELISA实验中的反应性状与该交点所示浓度的动物血清相近；e.利用d中所得浓度的动物血清做加标回收实验，确认回收率是否在80％‑120％，如有偏差，上下微调该动物血清浓度即可。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基于 血清 elisa 标准 稀释液 制备 方法 | ||
【主权项】：
1.一种基于血清的ELISA标准品稀释液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤，a.用缓冲液配制若干动物血清，血清浓度为5％‑95％，浓度梯度为5％，在各个浓度的动物血清中加入目标蛋白，取若干健康的人血清样本，加入目标蛋白，配制后目标蛋白浓度与动物血清中接近；所述缓冲液的pH为7.2～7.4；b.对加入目标蛋白后的各个浓度的动物血清与人血清样本做常规ELISA实验操作；c.制作OD曲线：Excel表横轴为动物血清浓度，纵轴为OD值制作OD曲线；d.确定与人血清样本OD平均值相交的动物血清浓度，即人血清中目标蛋白在ELISA实验中的反应性状与，人血清样本OD平均值与动物血清加标OD曲线的交点所示浓度的动物血清相近；e.利用d中所得浓度的动物血清做加标回收实验，确认回收率是否在80％‑120％，如有偏差，上下微调该动物血清浓度即可。
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