[发明专利]一种无血清Vero细胞制备轮状病毒疫苗原液的方法以及无血清轮状病毒疫苗制品在审
申请号: | 201710041301.2 | 申请日: | 2017-01-20 |
公开(公告)号: | CN106676076A | 公开(公告)日: | 2017-05-17 |
发明(设计)人: | 付作申;安有才;张玉辉;于海龙;刘鹏;徐奇;刘冰冰;陈辉黎;陈晓芬;冷文娜;张慧萍;安蕊 | 申请(专利权)人: | 江苏中慧元通生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N7/00 | 分类号: | C12N7/00;A61K39/15;A61P31/14;C12R1/93 |
代理公司: | 北京国帆知识产权代理事务所(普通合伙)11334 | 代理人: | 李增朝 |
地址: | 225312 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 提供一种无血清Vero细胞制备轮状病毒疫苗原液的方法,包含以下步骤,用无血清培养基培养Vero细胞,获得无血清培养基适应细胞株;利用获得的所述无血清培养基适应细胞株,建立无血清Vero细胞种子库;利用获得的所述无血清培养基适应细胞株,建立无血清轮状病毒毒株工作种子库;使用无血清培养基复苏、培养、传代、扩增Vero细胞工作种子库细胞,作为生物反应器培养的基础细胞,细胞扩增后,应用生物反应器和微载体,使用无血清培养基,连续灌流培养高密度Vero细胞;接种轮状病毒毒株工作种子库毒种后,进行生物反应器微载体无血清培养,在病毒扩增至高峰时,收获病毒液,收获液病毒滴度,经澄清、超滤浓缩、得到无血清人用轮状病毒原液。 | ||
搜索关键词: | 一种 血清 vero 细胞 制备 轮状病毒 疫苗 原液 方法 以及 制品 | ||
【主权项】:
一种无血清Vero细胞制备轮状病毒疫苗原液的方法,其特征在于,包含以下步骤,步骤1.用无血清培养基培养Vero细胞,获得无血清培养基适应细胞株;步骤2.利用获得的所述无血清培养基适应细胞株,建立无血清Vero细胞种子库;步骤3.利用获得的所述无血清培养基适应细胞株,建立无血清轮状病毒毒株工作种子库;步骤4.使用无血清培养基复苏、培养、传代、扩增Vero细胞工作种子库细胞,作为生物反应器培养的基础细胞,细胞扩增后,应用生物反应器和微载体,使用无血清培养基,连续灌流培养高密度Vero细胞;步骤5.接种轮状病毒毒株工作种子库毒种后,进行生物反应器微载体无血清培养,在病毒扩增至高峰时,收获病毒液,收获液病毒滴度,经澄清、超滤浓缩、灭活和纯化处理,得到无血清人用轮状病毒原液。
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