[发明专利]一种由大豆叶片再生愈伤组织的方法有效
| 申请号： | 201710042225.7 | 申请日： | 2017-01-20 |
| 公开（公告）号： | CN106818480B | 公开（公告）日： | 2019-03-12 |
| 发明（设计）人： | 姚陆铭;王彪;张鑫;卢欣欣;李瑶;邢茂玉;武天龙 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学 |
| 主分类号： | C12N5/04 | 分类号： | C12N5/04;A01H4/00 |
| 代理公司： | 上海旭诚知识产权代理有限公司 31220 | 代理人： | 郑立 |
| 地址： | 200240 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种由大豆叶片再生愈伤组织的方法，包括：1)大豆叶片的获取及消毒；其中，所述大豆叶片为第一对三出复叶；2)从所述大豆叶片进行原生质体的分离及收集；3)从所述原生质体再生愈伤组织。本发明简单高效，能够短时间产生大量的原生质体且活性高。同时原生质体再生愈伤组织再生率高。本发明将为大豆愈伤组织的进一步利用提供技术支持。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 大豆 叶片 再生 组织 方法 | ||
【主权项】：
1.一种由大豆叶片再生愈伤组织的方法，其特征在于，所述方法包括：1)大豆叶片的获取及消毒；其中，所述大豆叶片为第一对三出复叶；2)从所述大豆叶片进行原生质体的分离及收集；3)从所述原生质体再生愈伤组织；其中，步骤3)中，将步骤2)获得的所述原生质体用未凝固的含有低熔点琼脂糖的KP8培养基重悬，并以液滴形式滴在培养皿中，待培养基凝固后，加入KP8液体培养基，于26±2℃及避光条件下培养；在培养的第7、14、21及28天，将KP8液体培养基替换为KP8:K8混合比例分别为2:1、1:1、0:1、0:1的液体培养基；在培养的第35天，将液体培养基替换为生长培养基，所述生长培养基为添加有0.5mg/L的2,4‑D、0.5mg/L的苄氨基腺嘌呤、0.5mg/L的Kn及500mg/L CH的MSB液体培养基；将在所述生长培养基中培养7天后的愈伤组织转移至含有0.6％琼脂的MSB培养基表面，使愈伤组织继续生长，每2周利用含0.6％琼脂的MSB培养基进行一次继代培养。
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