[发明专利]一种燕麦花叶病毒的实时荧光RT‑PCR检测方法、引物和探针及试剂盒在审
| 申请号： | 201710043771.2 | 申请日： | 2017-01-19 |
| 公开（公告）号： | CN107043827A | 公开（公告）日： | 2017-08-15 |
| 发明（设计）人： | 张卫东;黄永辉;权永兵;廖力;徐淼锋;迟远丽 | 申请（专利权）人： | 珠海出入境检验检疫局检验检疫技术中心 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/94 |
| 代理公司： | 广州嘉权专利商标事务所有限公司44205 | 代理人： | 李先林 |
| 地址： | 519015 广东省*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明涉及生物物种分子诊断领域，公开了一种燕麦花叶病毒的实时荧光RT‑PCR检测方法、引物和探针及试剂盒。检测方法包括以下步骤S1、取待测样品提取植物组织总RNA；S2、以总RNA为模板，引入下游引物OMV‑R1进行反转录模板cDNA的合成；S3、将上游引物OMV‑F1、下游引物OMV‑R1和荧光探针OMV‑P置于荧光定量PCR仪中进行实时定量荧光PCR扩增反应；S4、荧光PCR仪读取Ct值判断检测的结果。本发明针对检疫性有害生物燕麦花叶病毒，设计了特异性引物和荧光探针，建立了实时定量荧光RT‑PCR快速检测OMV的方法，具有检测方法简单（全程闭管、无需电泳检测）、速度快定量准确、特异性强、灵敏度高等优点，适用于我国各大检验检疫机构针对检疫性有害生物燕麦花叶病毒的检疫鉴定。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 燕麦 花叶 病毒 实时 荧光 rt pcr 检测 方法 引物 探针 试剂盒 | ||
【主权项】：
一种用于燕麦花叶病毒的实时荧光RT‑PCR检测的引物和探针，包括上游引物OMV‑F1、下游引物OMV‑R1和荧光探针OMV‑P，其序列分别如下：OMV‑F1：5′‑ACGGTTTTCCTCATCGGGAG‑3′；OMV‑R1：5′‑TCATCCAAGGACGAGGGACA‑3′；OMV‑P：5′‑FAM‑TCAAACGAATATGCAGGGTTGACA‑BHQ1‑3′。
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