[发明专利]一种改变黑曲霉基因组局部结构提高纤维素酶表达量的方法有效
| 申请号： | 201710045636.1 | 申请日： | 2017-01-22 |
| 公开（公告）号： | CN106755029B | 公开（公告）日： | 2019-11-08 |
| 发明（设计）人： | 薛栋升;梁龙元 | 申请（专利权）人： | 湖北工业大学 |
| 主分类号： | C12N15/67 | 分类号： | C12N15/67;C12N15/65;C12N1/15;C12R1/685 |
| 代理公司： | 武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 42222 | 代理人： | 常海涛 |
| 地址： | 430068 湖北*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种改变黑曲霉基因组局部结构提高纤维素酶表达量的方法，属于基因工程领域。本发明方法包括如下步骤：将两端有限制性内切酶识别位点且含有SEQ ID NO.1所示序列的同源重组片段通过相应限制性内切酶和DNA连接酶构建到载体上；将所构建的重组载体转化到黑曲霉中，筛选同源重组成功的黑曲霉菌株，同源重组成功的黑曲霉菌株的纤维素酶表达量得到提高。本发明把一段含有潮霉素B抗性表达单元盒和外加片段的序列通过同源重组的方式整合到黑曲霉基因组中改变整个基因组的长度，从而改变β‑葡萄糖苷酶表达单元在整个基因组中的位置，增强了β‑葡萄糖苷酶的表达效率。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 变黑 曲霉 基因组 局部 结构 提高 纤维素酶 表达 方法 | ||
【主权项】：
1.一种改变黑曲霉基因组局部结构提高纤维素酶表达量的方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）将两端有限制性内切酶识别位点且含有SEQ ID NO.1所示序列的同源重组片段通过相应限制性内切酶和DNA连接酶构建到载体上；（2）将步骤（1）构建的重组载体转化到黑曲霉中，筛选同源重组成功的黑曲霉菌株；同源重组成功的黑曲霉菌株的纤维素酶表达量得到提高；所述的黑曲霉为黑曲霉ATCC16404。
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