[发明专利]一种用于检测阿胶糕中阿胶含量的组合物及其检测方法有效

专利信息
申请号: 201710046585.4 申请日: 2017-01-19
公开(公告)号: CN106680398B 公开(公告)日: 2019-11-29
发明(设计)人: 周祥山;郝向慧;郭尚伟;段小波;徐云鹏;王静;王玉娇;石永坚;郑海荣 申请(专利权)人: 东阿阿胶股份有限公司
主分类号: G01N30/02 分类号: G01N30/02;G01N30/06
代理公司: 11139 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 代理人: 孙皓晨;马鑫<国际申请>=<国际公布>=
地址: 252299 山*** 国省代码: 山东;37
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摘要: 发明公开了一种用于检测阿胶糕中阿胶含量的组合物及其检测方法。所述组合物由多肽I、多肽II、多肽III以及对照品检测基质组成,所述多肽I的氨基酸序列为SEQ ID NO.1所示,多肽II的氨基酸序列为SEQ ID NO.2所示,多肽III的氨基酸序列为SEQ ID NO.3所示,对照品检测基质为鱼皮胶。该组合物可用于检测阿胶糕中驴皮源成分含量,从而判断阿胶真伪。通过多肽I的检测值减去多肽II的检测值,并利用多肽III的检测值来修正检测偏差,从而实现对阿胶糕中驴皮源成分的含量检测。该方法具有含量检测准确、操作简单的优点,具有广泛的应用前景。
搜索关键词: 一种 用于 检测 阿胶 含量 组合 及其 方法
【主权项】:
1.一种检测阿胶糕中阿胶含量的方法,其特征在于,包括如下步骤:/n1)对照品溶液的制备:/n对照品检测基质粉碎后,称取一定量的对照品检测基质于量瓶中,加入NH4HCO3溶液,超声使样品完全溶解,得到基质溶液,用配制得到的基质溶液溶解称量好的多肽I、多肽II和多肽III,摇匀,得到对照品母液,采用分步稀释的方法,以基质溶液为溶剂,将对照品母液稀释500-10000倍,微孔滤膜过滤,续滤液中加胰蛋白酶溶液,酶解;/n其中,所述多肽I的氨基酸序列为Gly-Ala-Thr-Gly-Pro-Ala-Gly-Val-Arg,多肽II的氨基酸序列为Gly-Ile-Hyp-Gly-Pro-Val-Gly-Ala-Ala-Gly-Ala-Thr-Gly-Ala-Arg,多肽III的氨基酸序列为Gly-Ser-Glu-Gly-Pro-Gln-Gly-Val-Arg,对照品检测基质为鱼皮胶;/n2)待检测样品溶液的制备:/n将待检样品粉碎均质后,称取一定量,重量记为N1,加入水充分混合,离心,取上清液加入三氯乙酸和水,超声5-20min,4℃静置,离心后去除上清液,沉淀用丙酮洗涤、干燥后称重,重量记为N2,称取一定量的沉淀干燥物,用胰蛋白酶酶解;/n3)将对照品溶液、待检测样品溶液分别放入液质联用仪,选择m/z393.4→499.3、643.3,m/z634.7→927.5、830.4,m/z444.0→331.2、613.3作为检测离子对进行MRM扫描,其中选择m/z393.4→499.3、m/z634.7→927.5、m/z444.0→331.2分别作为多肽I、多肽II、多肽III的检测离子进行定量检测,待检测阿胶样品中多肽I的含量记为M1、多肽II的含量记为M2、多肽III的含量记为M3;/n4)按下式计算出阿胶糕样品中阿胶的含量:/n阿胶糕中阿胶的含量(%)=(M1/784.8–M2/1267.4)×1771.8/M3×3×N2/N1×100%。/n
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