[发明专利]一种用于检测阿胶糕中阿胶含量的组合物及其检测方法有效
申请号: | 201710046585.4 | 申请日: | 2017-01-19 |
公开(公告)号: | CN106680398B | 公开(公告)日: | 2019-11-29 |
发明(设计)人: | 周祥山;郝向慧;郭尚伟;段小波;徐云鹏;王静;王玉娇;石永坚;郑海荣 | 申请(专利权)人: | 东阿阿胶股份有限公司 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06 |
代理公司: | 11139 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 | 代理人: | 孙皓晨;马鑫<国际申请>=<国际公布>= |
地址: | 252299 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明公开了一种用于检测阿胶糕中阿胶含量的组合物及其检测方法。所述组合物由多肽I、多肽II、多肽III以及对照品检测基质组成,所述多肽I的氨基酸序列为SEQ ID NO.1所示,多肽II的氨基酸序列为SEQ ID NO.2所示,多肽III的氨基酸序列为SEQ ID NO.3所示,对照品检测基质为鱼皮胶。该组合物可用于检测阿胶糕中驴皮源成分含量,从而判断阿胶真伪。通过多肽I的检测值减去多肽II的检测值,并利用多肽III的检测值来修正检测偏差,从而实现对阿胶糕中驴皮源成分的含量检测。该方法具有含量检测准确、操作简单的优点,具有广泛的应用前景。 | ||
搜索关键词: | 一种 用于 检测 阿胶 含量 组合 及其 方法 | ||
【主权项】:
1.一种检测阿胶糕中阿胶含量的方法,其特征在于,包括如下步骤:/n1)对照品溶液的制备:/n对照品检测基质粉碎后,称取一定量的对照品检测基质于量瓶中,加入NH4HCO3溶液,超声使样品完全溶解,得到基质溶液,用配制得到的基质溶液溶解称量好的多肽I、多肽II和多肽III,摇匀,得到对照品母液,采用分步稀释的方法,以基质溶液为溶剂,将对照品母液稀释500-10000倍,微孔滤膜过滤,续滤液中加胰蛋白酶溶液,酶解;/n其中,所述多肽I的氨基酸序列为Gly-Ala-Thr-Gly-Pro-Ala-Gly-Val-Arg,多肽II的氨基酸序列为Gly-Ile-Hyp-Gly-Pro-Val-Gly-Ala-Ala-Gly-Ala-Thr-Gly-Ala-Arg,多肽III的氨基酸序列为Gly-Ser-Glu-Gly-Pro-Gln-Gly-Val-Arg,对照品检测基质为鱼皮胶;/n2)待检测样品溶液的制备:/n将待检样品粉碎均质后,称取一定量,重量记为N1,加入水充分混合,离心,取上清液加入三氯乙酸和水,超声5-20min,4℃静置,离心后去除上清液,沉淀用丙酮洗涤、干燥后称重,重量记为N2,称取一定量的沉淀干燥物,用胰蛋白酶酶解;/n3)将对照品溶液、待检测样品溶液分别放入液质联用仪,选择m/z393.4→499.3、643.3,m/z634.7→927.5、830.4,m/z444.0→331.2、613.3作为检测离子对进行MRM扫描,其中选择m/z393.4→499.3、m/z634.7→927.5、m/z444.0→331.2分别作为多肽I、多肽II、多肽III的检测离子进行定量检测,待检测阿胶样品中多肽I的含量记为M1、多肽II的含量记为M2、多肽III的含量记为M3;/n4)按下式计算出阿胶糕样品中阿胶的含量:/n阿胶糕中阿胶的含量(%)=(M1/784.8–M2/1267.4)×1771.8/M3×3×N2/N1×100%。/n
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