[发明专利]一种提高地衣芽胞杆菌外源蛋白分泌水平的方法在审
| 申请号： | 201710052525.3 | 申请日： | 2017-01-24 |
| 公开（公告）号： | CN106893736A | 公开（公告）日： | 2017-06-27 |
| 发明（设计）人： | 陈守文;王豪;蔡冬波;何鹏辉;朱江;魏雪团;朱程军 | 申请（专利权）人： | 湖北大学 |
| 主分类号： | C12N15/75 | 分类号： | C12N15/75;C12N15/67;C12N15/57;C12N9/28;C12N9/54;C12N9/24;C12N1/20;C12R1/10 |
| 代理公司： | 武汉河山金堂专利事务所(普通合伙)42212 | 代理人： | 胡清堂 |
| 地址： | 430000 湖北*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种提高地衣芽胞杆菌外源蛋白分泌水平的方法，包括步骤S1，构建信号肽肽酶SppA整合载体，导入地衣芽胞杆菌中，通过同源单双交换，过表达信号肽肽酶SppA，从而得到地衣芽胞杆菌整合菌株；S2，将外源蛋白的表达质粒电转入S1所述地衣芽胞杆菌整合菌株中，从而得到地衣芽胞杆菌外源蛋白表达菌株；S3，将S2所述地衣芽胞杆菌外源蛋白表达菌株于种子培养基中进行活化，得到活化的种子液；S4，将S3中所述种子液于相应外源蛋白液体发酵培养基中进行发酵，即可提高所述外源蛋白分泌水平。本发明中地衣芽胞杆菌过表达信号肽肽酶SppA后其外源蛋白的分泌量显著提高，说明对地衣芽胞杆菌过表达信号肽肽酶SppA可以有效提高其外源蛋白的分泌水平。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 提高 地衣 杆菌 蛋白 分泌 水平 方法 | ||
【主权项】：
一种提高地衣芽胞杆菌外源蛋白分泌水平的方法，其特征在于，具体包括以下步骤：S1，构建信号肽肽酶SppA整合载体，导入地衣芽胞杆菌中，通过同源单双交换，过表达信号肽肽酶SppA，从而得到地衣芽胞杆菌整合菌株；S2，将外源蛋白的表达质粒电转入S1所述地衣芽胞杆菌整合菌株中，从而得到地衣芽胞杆菌外源蛋白表达菌株；S3，将S2所述地衣芽胞杆菌外源蛋白表达菌株于种子培养基中进行活化，得到活化的种子液；S4，将S3中所述种子液于相应外源蛋白液体发酵培养基中进行发酵，即可提高所述外源蛋白分泌水平。
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