[发明专利]一种检测牛、羊、猪源性成分的三重实时荧光PCR方法

摘要

检测牛、羊、猪源性成分的三重荧光PCR方法，具有样品DNA、一对通用引物和三条探针、荧光PCR预混液、阳性对照等4个要素；根据牛、绵羊和山羊、猪的甘油醛‑3‑磷酸脱氢酶基因设计引物和探针，对目标序列进行扩增并激发和淬灭荧光信号，对非目标序列无扩增和荧光信号；将待测样品DNA进行荧光PCR扩增的试剂配方和扩增条件制成试剂盒；具体做法包括：建立检测牛、羊、猪源性成分的三重荧光PCR引物体系；建立检测牛、羊、猪源性成分的三重荧光PCR试剂盒；确定检测牛、羊、猪源性成分的三重荧光PCR鉴定方法。本发明具有标准误差小、检测时间短、可同时检测多个目标基因、节约试剂成本的优点；适用于动物产品的真假鉴别。

主权项

检测牛、羊、猪源性成分的三重荧光PCR方法，具有三重荧光PCR技术的4个要素，即：样品DNA、一对通用引物和三条探针、荧光PCR预混液、阳性对照；其特征在于：根据牛、绵羊和山羊、猪的甘油醛‑3‑磷酸脱氢酶基因设计引物和探针，对目标序列进行扩增并激发和淬灭荧光信号，对非目标序列无扩增和荧光信号；将待测样品DNA进行荧光PCR扩增的试剂配方和扩增条件制成试剂盒；具体的做法包括：第一步，建立检测牛、羊、猪源性成分的三重荧光PCR引物体系；第二步，建立检测牛、羊、猪源性成分的三重荧光PCR试剂盒；第三步，确定检测牛、羊、猪源性成分的三重荧光PCR鉴定方法，即以待测样品总DNA为模板，利用所述的三重荧光PCR引物体系，在可同时检测FAM、HEX、TARMA等激发荧光信号和MGB淬灭荧光信号的三通道及以上的荧光PCR仪上进行扩增和检测。