[发明专利]一种海风藤离体快速繁殖方法

摘要

本发明公开了一种海风藤离体快速繁殖方法，涉及植物组织培养技术领域。该方法具体步骤包括：(1)外植体预处理、选取和消毒；(2)海风藤腋芽诱导培养；(3)海风藤不定芽的增殖培养；(4)海风藤不定芽的增殖壮苗培养；(5)海风藤不定芽的生根培养。本发明所述海风藤高效离体快繁方法，其增殖率高及试管苗品质优良，能满足海风藤人工栽培的规模化生产需求，以解决野生海风藤资源日渐稀少而市场上供不应求的现状。

主权项

1.一种海风藤离体快速繁殖方法，其特征在于，具体步骤如下：①外植体的预处理、选取和消毒选择长势旺盛的健康海风藤，喷施30％代森锰锌悬浮液800倍液，每周喷施一次，连续3次；然后剪取海风藤新长出的前5节藤茎，将其藤茎剪成3～5cm的带芽茎，用洗洁精水溶液清洗干净，晾干备用；在超净工作台上用72％乙醇溶液浸泡30～35秒，再用无菌水冲洗2～3次，用无菌滤纸吸干；再用0.1％升汞溶液消毒，前2节嫩茎消毒7～9min，后3节藤茎消毒10～12min，再用无菌水清洗3～4遍，然后用无菌滤纸吸干后备用；②海风藤腋芽诱导培养将步骤①处理后的外植体转接到腋芽诱导培养基上，进行诱导培养30～40天，诱导出高为3～5cm的腋芽；所述腋芽诱导培养基的配方为：1/2MS+5.5g/L琼脂+20g/L白糖，pH值为5.8；③海风藤不定芽的增殖培养将步骤②诱导培养后的腋芽转接到不定芽增殖培养基上，进行增殖培养30～40天，再将腋芽分切成一节节带芽部分并将其转接到不定芽增殖培养基上，如此循环操作，获得海风藤不定芽；所述不定芽增殖培养基的配方为：MS+0.2mg/L 6‑BA+5.5g/L琼脂+30g/L白糖，pH值为5.8；④海风藤不定芽的增殖壮苗培养将步骤③增殖培养后的不定芽转接到增殖壮苗培养基上，进行壮苗培养30～40天，使植株长高长壮并产生若干丛生苗；所述增殖壮苗培养基的配方为：MS+0.2mg/L 6‑BA+1.0mg/L KT+10mg/L多效唑+5.5g/L琼脂+30g/L白糖，pH值为5.8；⑤海风藤不定芽的生根培养将经步骤④壮苗培养后的丛生苗转接到生根培养基上，进行生根培养30～40天，使幼苗基部长出3条以上根系，进行海风藤组培苗的驯化和移栽；所述生根培养基的配方为：MS+0.3mg/L KT+5.5g/L琼脂+30g/L白糖+0.2％活性炭，pH值为5.8。