[发明专利]一种用于栽培蓝莓的菌根真菌土的制备方法及应用

摘要

本发明属于果树栽培技术领域，具体涉及一种栽培蓝莓的菌根真菌土的制备方法及应用。通过采集杜鹃花菌根的土样，进行菌种的分离纯化、回接到蓝莓植物根系，使菌根侵染率达到52％，而正常栽培的蓝莓菌根不足3％。本发明具有提高蓝莓菌根真菌侵染率的显著效果，同时取材方便、克服了采集野生蓝莓菌根真菌所受到的地理分布的局限性，从而得以更大限度地发挥菌根的有益作用。

主权项

1.一种用于栽培蓝莓的菌根真菌土的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：/n（1）、菌根真菌的取样：选取生长健壮的杜鹃花树，在树干周围20cm处向下挖至主要根系分布处，在菌根周围取土样；/n（2）、制备土壤稀释液：过滤所取土样，将过滤后土样连同细根一起放入装有无菌水的三角瓶中，振荡摇晃使土与水充分混合，用无菌吸管从中吸取土壤悬液注入盛有无菌水的试管中，制成10^-1、10^-2、10^-3…不同稀释倍数的土壤溶液；/n（3）、倒平板：将预先制备的马丁氏培养基熔化，待冷却至55℃~60℃时，向马丁氏培养基中加入链霉素溶液，使每1ml马丁氏培养基中含有链霉素30-60ug；在无菌操作下向培养皿内注入培养基，平置于桌面上，待凝固后成平板；/n（4）、涂布真菌：将步骤（3）中所得的平板分别标上不同稀释倍数，用无菌吸管从土壤稀释液中吸取0.2~0.4ml不同稀释倍数10^-1、10^-2、10^-3…加入到对应稀释倍数的平板中，用无菌玻璃棒在培养基平板表面轻涂均匀；/n（5）、培养及挑菌：将上述培养基平板倒置于28℃培养箱培养60~72h；将培养后长出的单个菌落分别挑取接种到培养基的斜面上于28℃培养，待菌苔长出后，检查菌苔是否单纯，如有其它杂菌混杂，再次进行分离纯化，直至把真菌分纯为止；/n（6）、无菌河沙土的制备：向河沙土中加入10wt%稀盐酸，加热煮沸30min；倒去酸水，用水冲洗至中性；烘干，40目过筛去掉粗颗粒；装入小试管，塞上棉塞，进行灭菌、烘干；/n（7）、菌根真菌土的培养：选择培养成熟的优良菌株，用无菌水洗，制成孢子悬液；向每个装有河沙土小试管中加入1.0~1.2ml孢子悬液，以接种针拌匀；放入真空干燥器内，抽干水分，存放于冰箱或室内干燥处备用。/n