[发明专利]一种适配子结合蛋白的检测方法

摘要

本发明涉及一种可以特异、灵敏地检测适配子结合蛋白的分析方法。该方法通过识别探针去招募结合蛋白，利用DNA双链杂交的方式将光交联基团引入到结合蛋白，并通过光引发将结合蛋白共价键合到捕捉探针上，实现了适配子结合蛋白的高效鉴定。本方法解决了由于适配子与结合蛋白作用力较弱，适配子结合蛋白难以鉴定的问题，适用于丰度较低的、结合力较弱的适配子互作蛋白分析。本发明的探针合成过程简单、选择性好、灵敏度高，可以实现对实际体系中适配子结合蛋白的特异性检测与富集。

主权项

1.一种双探针，包括识别探针和捕捉探针，其特征在于：所述识别探针是单链寡核苷酸，包括串联连接的适配子序列和被捕捉序列；所述捕捉探针包括捕捉序列以及修饰在捕捉探针上的光交联基团和报告基团，所述捕捉序列是单链寡核苷酸；识别探针上的适配子序列用于识别并结合适配子结合蛋白，捕捉探针的捕捉序列用于识别识别探针上的被捕捉序列，并通过碱基互补作用与识别探针的被捕捉序列结合；所述识别探针的被捕捉序列位于适配子序列的3’端，并且光交联基团位于捕捉探针的3’端，报告基团位于捕捉探针的5’端；或者所述识别探针的被捕捉序列位于适配子序列的5’端，并且光交联基团位于捕捉探针的5’端，报告基团位于捕捉探针的3’端。