[发明专利]一种单细胞分选用标签珠的制备方法与应用在审
| 申请号： | 201710064169.7 | 申请日： | 2017-02-04 |
| 公开（公告）号： | CN108396056A | 公开（公告）日： | 2018-08-14 |
| 发明（设计）人： | 季劼;孙倍成 | 申请（专利权）人： | 江苏省人民医院 |
| 主分类号： | C12Q1/6806 | 分类号： | C12Q1/6806;G01N15/14 |
| 代理公司： | 江苏圣典律师事务所 32237 | 代理人： | 杨文晰;孙忠浩 |
| 地址： | 210000 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种单细胞分选用标签珠的制备方法与应用，即通过特制带有荧光和特殊碱基序列的标签珠，通过流式细胞分选仪，实现将裂解出的单细胞内的mRNA进行标签标记的功能，从而使得单细胞测序所需的分选工作变得更加简洁高效，有效的解决了目前单细胞测序中分选困难标签困难的技术难题，同时适合进行大规模的单细胞测序实验。 | ||
| 搜索关键词： | 标签 测序 分选 制备 流式细胞分选仪 标签标记 技术难题 碱基序列 荧光 裂解 应用 | ||
【主权项】：
1.一种单细胞分选用标签珠的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：1）在珠子表面上合成荧光基团6‑FAM；2）将珠子等分成四份，分别在珠子表面合成单个的脱氧鸟苷酸、脱氧腺苷酸、脱氧胸苷酸和脱氧胞苷酸；合成完毕后，将四份珠子混合后再随机等分成四份，再次分别合成上述四种脱氧核苷酸，如此重复共合成12次；3）将四份珠子全部混合后加入含有脱氧鸟苷酸、脱氧腺苷酸、脱氧胸苷酸和脱氧胞苷酸的混合溶液中再次合成反应8次；4）将珠子加入脱氧胸苷酸溶液中再次合成反应30次，即获得所述单细胞分选用标签珠。
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