[发明专利]经修饰的亮氨酸脱氢酶有效
申请号: | 201710068954.X | 申请日: | 2013-03-27 |
公开(公告)号: | CN107043754B | 公开(公告)日: | 2021-07-06 |
发明(设计)人: | 星野亘;小玉优哉;水越利巳;田上宇乃 | 申请(专利权)人: | 味之素株式会社 |
主分类号: | C12N9/06 | 分类号: | C12N9/06;C12Q1/32;G01N33/68;C12N15/53;C12P13/04 |
代理公司: | 北京市柳沈律师事务所 11105 | 代理人: | 张文辉;易方方 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | 本发明提供用于测定总支链氨基酸浓度的手段和方法。具体而言,本发明提供经修饰的酶,其中至少一个氨基酸残基被突变,以改善与总支链氨基酸的测定相关联的亮氨酸脱氢酶的特性,(例如,所述亮氨酸脱氢酶对总支链氨基酸的底物特异性,所述亮氨酸脱氢酶对任意支链氨基酸的活性,和亮氨酸脱氢酶的热稳定性);以及分析总支链氨基酸的方法,包括利用所述的经修饰的酶测定试验样品中包含的总支链氨基酸。 | ||
搜索关键词: | 修饰 亮氨酸 脱氢酶 | ||
【主权项】:
经修饰的酶,其中至少一个氨基酸残基被突变,以改善亮氨酸脱氢酶的选自下组的一种或多种的特性:(a)所述亮氨酸脱氢酶对总支链氨基酸的底物特异性;(b)所述亮氨酸脱氢酶对任意支链氨基酸的活性;和(c)所述亮氨酸脱氢酶的热稳定性,其中所述的突变是亮氨酸脱氢酶的氨基酸序列中的GVI基序中的异亮氨酸的取代,其中所述GVI基序中的异亮氨酸被苯丙氨酸,组氨酸,天冬酰胺,酪氨酸,亮氨酸,赖氨酸,谷胺酰胺,精氨酸,天冬氨酸,苏氨酸,谷氨酸,丝氨酸,半胱氨酸,丙氨酸,甘氨酸,缬氨酸,色氨酸,或甲硫氨酸取代。
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