[发明专利]一种提高哺乳动物细胞中外源基因表达水平的基因片段、重组载体及其用途有效
| 申请号： | 201710069604.5 | 申请日： | 2017-02-08 |
| 公开（公告）号： | CN107043773B | 公开（公告）日： | 2018-09-18 |
| 发明（设计）人： | 罗世超;罗川 | 申请（专利权）人： | 四川丰讯科技发展有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/85 |
| 代理公司： | 成都高远知识产权代理事务所(普通合伙) 51222 | 代理人： | 李高峡;张娟 |
| 地址： | 610041 四川省成都市武*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种提高哺乳动物细胞中外源基因表达水平的基因片段，其特征在于：其核苷酸如SEQ ID NO.1或2所示。本发明还公开了一种重组质粒，它是将pcDNA3.1(+)质粒中启动子CMV替换为CHEF‑alpha基因5’端的长度为1543bp序列，以及BGHPA替换为CHEF‑alpha基因3’端的长度为610bp序列，在启动子上游插入鸡溶菌酶MAR序列，筛选标记基因Neo替换为DHFR基因的重组质粒。本发明还公开了重组质粒的用途。本发明重组质粒携带外源基因转染哺乳细胞，外源基因的表达水平高，且外源基因的表达水平可以持续稳定高产，应用前景良好。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 提高 哺乳动物 细胞 中外 基因 表达 水平 片段 重组 载体 及其 用途 | ||
【主权项】：
1.一种重组质粒，其特征在于：它是将pcDNA3.1(+)质粒中启动子CMV替换为CHEF‑alpha基因5’端的长度为1543bp序列，以及BGHPA替换为CHEF‑alpha基因3’端的长度为610bp序列的重组质粒；所述重组质粒在插入的CHEF‑alpha基因5’端的长度为1543bp序列的5’端还插入有鸡溶菌酶的MAR基因；所述CHEF‑alpha基因5’端的长度为1543bp序列如SEQ ID NO.3所示；所述CHEF‑alpha基因3’端的长度为610bp序列如SEQ ID NO.4所示；所述MAR基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示。
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