[发明专利]蒽贝素的质量控制方法

摘要

本发明公开了一种蒽贝素的质量控制方法，特别是以酸藤子属植物酸藤子（Embelia laeta(Linn.)Mez）成熟干果为原料，提取高纯度蒽贝素并对其进行检测的方法，其过程是：取酸藤子植物提取后，以酸藤子干果为原料，用乙醚提取，经硅胶柱层析分离，用TLC检测合并，收集含有蒽贝素的流分，再用反相制备高效液相法分离，对所收集的每一份洗脱液利用分析型高效液相色谱检测，合并保留高纯度蒽贝素组分，采用薄层色谱和液相色谱进行质量控制，该方法不仅能提高蒽贝素纯度，而且能降低生产成本。

主权项

1.一种蒽贝素的质量控制方法，其特征在于：以酸藤子属植物酸藤子成熟干果为原料，提取高纯度蒽贝素，然后对其进行检测；所述高纯度蒽贝素的制备方法如下：1）提取：取酸藤子成熟干果，加乙醚提取，浓缩，过滤，经硅胶柱层析，用石油醚‑乙酸乙酯溶液体系进行梯度洗脱，收集含有蒽贝素的洗脱液，合并，浓缩，即得蒽贝素粗结晶；2）精制：用制备型高效液相色谱法分离纯化蒽贝素粗结晶，用C‑18色谱柱，配合甲醇‑水体系进行梯度洗脱，用甲醇‑水体系将蒽贝素粗结晶溶解后，注入制备型高效液相色谱仪，收集纯度在90%以上的蒽贝素溶液，减压浓缩，即得；所述蒽贝素的检测包括采用薄层色谱法进行定性检测和采用高效液相色谱法进行定量检测，检测过程如下：（1）采用薄层色谱法进行定性检测：用蒽贝素对照品参比的方法，其色谱条件为，以硅胶G为层析板，层析板用3%草酸浸泡过，分别以甲苯‑乙酸乙酯重量比例10‑15:1‑2为展开剂，石油醚：乙酸乙酯重量比例10‑15:1.2‑2为展开剂，石油醚‑甲苯‑乙酸乙酯重量比例5‑8:5‑8:1‑2为展开剂；然后浓硫酸乙醇显色，置于白光下检视，在薄层色谱中三个展开系统下均为黄色的单一的荧光斑点，则代表纯度符合要求，否则不符合要求；取蒽贝素样品用甲醇制1mg/ml的溶液，在同一硅胶G层析板上，层析板用3%草酸浸泡过，按不同的点样量梯度点样，点样量分别为20μg、40μg、60μg、80μg、100μg；分别以甲苯‑乙酸乙酯重量比例10：1为展开剂，或者石油醚：乙酸乙酯重量比例10:1.2为展开剂，或者石油醚‑甲苯‑乙酸乙酯重量比例5:5:1为展开剂；置展开缸分别展开，展距为15cm，然后浓硫酸乙醇显色，置于白光下检视，在5个不同浓度的梯度点样及三个展开系统薄层色谱中，均为黄色的单一的荧光斑点；（2）采用高效液相色谱法进行定量检测：其色谱条件为：色谱柱为十八烷基键合硅胶填充剂；分别以乙腈‑醋酸水体积比为10‑90:90‑10，甲醇‑醋酸水体积比为20‑80:90‑10为流动相；检测波长280‑310nm；流速为0.5～5毫升/分钟；含量与纯度测定：分别用2个流动相溶剂系统和2个检测波长，记录色谱图至主成分的出峰保留时间的2.5倍以上，用面积归一化法计算含量，结果系统测定样品含量在均98%以上；杂质检查，分别在不同系统记录的色谱图中，除溶剂峰外，杂质峰面积总和结果均小于2.0%。