[发明专利]一种标记植物花粉微丝微管细胞骨架的方法及其试剂盒

摘要

本发明提供一种用于标记植物花粉微丝微管细胞骨架的试剂盒，包括花粉固定液试剂A，花粉洗涤液试剂B，花粉微丝染料试剂组合C，以及花粉微管染料试剂组合D。本发明还提供利用该试剂盒标记植物花粉微丝微管细胞骨架的方法，具体流程如下：培养花粉—固定花粉管—洗涤花粉管—微丝染料室温染色花粉管—微管染料室温染色花粉管—激光共聚焦显微镜观察。本方法可实现快速、灵敏、准确性高、简便地观察木本植物花粉管内微丝微管骨架结构与排列方式，为直观观察木本植物花粉管内微丝微管骨架结构与排列方式提供技术支持。

主权项

1.用于标记植物花粉微丝微管细胞骨架的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括花粉固定液试剂A，花粉洗涤液试剂B，花粉微丝染料试剂组合C，以及花粉微管染料试剂组合D；其中，所述试剂A由多聚甲醛、EGTA、PIPES、MgCl2和蔗糖组成；所述试剂B由Tris‑HCl、NaCl和蔗糖组成；所述试剂组合C包括0.1～0.15％NP‑40、0.06～0.08％NP‑40和Alex‑561‑phalloidin染色液；所述试剂组合D包括Cellulose和PectolyaseY‑23混合液、0.1～0.15％NP‑40、0.06～0.08％NP‑40、甘氨酸溶液、一抗anti‑a‑Tubulin、二抗FITC‑anti‑mouse‑IgG以及Tris‑HCl、NaCl和甘氨酸的混合液；优选地，所述植物为苹果。