[发明专利]一种多肽衍生化方法及其在MALDI‑TOF‑MS检测药物代谢物中的应用

摘要

本发明公开了一种化学衍生化基质辅助激光解析电离‑飞行时间质谱技术(MALDI‑TOF‑MS)的分析方法。本发明首先使用二醛类化合物对含有氨基结构药物代谢物进行修饰，使得药物代谢代谢物能够衍生出带有醛基的基团，再使用多肽对醛基衍生物进行衍生化，通过MALDI‑TOF‑MS检测。将药物代谢产物多肽化后能够得到简洁单一的准分子离子峰，不仅显著改善了这些代谢产物在质谱中的辨识度，也极大的提高了药物代谢物在质谱中检测灵敏度。该方法灵敏度高、应用范围广、操作便捷、基质干扰极小、样品需求量低，无需制备附在的基质和衍生化试剂，即可定量检测代谢物中含量极低的氨基代谢产物。在代谢组学研究中有很大的应用前景。

主权项

一种多肽衍生具有化氨基代谢结构小分子化合物结合MALDI‑TOF‑MS的方法，其特征包括以下步骤：(1)小分子化合物：以二醛类化合物为连接臂，通过缩合反应修饰至氨基化合物上，使药物代谢产物结构衍生出醛基基团。(2)多肽衍生化小分子化合物：将醛类化合物、多肽以摩尔比50‑100:1加入到pH为4‑6的磷酸缓冲液中，在5‑37℃下发生缩合反应，多肽的氨基酸序列N端半胱氨酸修饰，作为醛类化合物衍生化试剂。(3)MALDI‑TOF‑MS分析：样品衍生化按照1μL样品混合基质α‑氰基‑4‑羟基肉桂酸CHCA点板，室温风干后进行基质辅助激光解析电离‑飞行时间质谱，采用正离子反射模式。