[发明专利]一种携带抗肿瘤蛋白靶向性exosome的制备方法及其应用

摘要

本发明公开了一种携带抗肿瘤蛋白靶向性exosome的制备方法及其应用，所述携带抗肿瘤蛋白靶向性exosome的制备方法在样本中提取exosome；对的exosome进行分离纯化，提取exosomes囊体颗粒。本发明能够高效抑制肿瘤的生长，为恶性的治疗提供了一种潜在的理想的治疗方法,利用分离纯化的方法提取exosome，能够方便、高效、标准化的进行分离，流程简单、操作方便。提高了工作效率。

主权项

一种携带抗肿瘤蛋白靶向性exosome的制备方法，其特征在于，所述携带抗肿瘤蛋白靶向性exosome的制备方法包括:取样本产物1μl加入到100μl exosome膜蛋白感受态细胞中，冰浴30min。然后42℃热激60s，立即冰浴2min；加入500μl无抗性LB液体培养基，于37℃下200rpm培养1h，取菌液低速离心弃部分上清，将剩余菌液全部涂布于含有50μg/ml嘌呤霉素的LB平板上，于37℃培养12h‑16h；挑选单菌落于加有500μl含50μg/ml嘌呤霉素的LB液体培养基中，37℃200rpm培养12h‑16h；挑选单菌落过夜培养进行菌落PCR鉴定，反应结束后取5μl反应产物进行琼脂糖凝胶电泳检测；并用质粒小提试剂盒提取表达质粒；将表达质粒转染到抗肿瘤蛋白中，筛选获得稳定表达抗肿瘤融合蛋白的细胞体系；对抗肿瘤融合蛋白的细胞体系进行分离纯化，提取exosomes囊体颗粒。