[发明专利]催化甲醛合成羟基乙醛的酶及其应用

摘要

本发明公开了催化甲醛合成羟基乙醛的酶及其应用。本发明通过定点突变BFD发现该酶的突变体，利用该酶的突变体实现了甲醛高效聚合，同时利用F/XPK实现了羟基乙醛或1,3‑二羟基丙酮(DHA)生成乙酰磷酸，结合磷酸乙酰转移酶(Pta)，三步酶就能够实现甲醛到乙酰辅酶A，从而创建一条新的甲醛同化途径‑甲醛三步合成乙酰辅酶A，此途径路线短，且没有碳损失及ATP输入。

主权项

1.苯甲酰甲酸脱羧酶突变体蛋白，为如下1）‑4）中任一所示：1）所示的苯甲酰甲酸脱羧酶突变体W86R‑N87T的氨基酸序列为将苯甲酰甲酸脱羧酶氨基酸序列的第86位的色氨酸突变为精氨酸，且将第87位的天冬酰胺突变为苏氨酸，其他氨基酸残基保持不变，得到的序列；2）所示的苯甲酰甲酸脱羧酶突变体W86R‑N87T‑L109G‑L110E为将苯甲酰甲酸脱羧酶氨基酸序列的第86位的色氨酸突变为精氨酸，且将第87位的天冬酰胺突变为苏氨酸，且将第109位的亮氨酸突变为甘氨酸，且将第110位的亮氨酸突变为谷氨酸，其他氨基酸残基保持不变，得到的序列；3）所示的苯甲酰甲酸脱羧酶突变体W86R‑N87T‑L109G‑L110E‑A460M为将苯甲酰甲酸脱羧酶氨基酸序列的第86位的色氨酸突变为精氨酸，且将第87位的天冬酰胺突变为苏氨酸，且将第109位的亮氨酸突变为甘氨酸，且将第110位的亮氨酸突变为谷氨酸，且将第460位的丙氨酸突变为甲硫氨酸，其他氨基酸残基保持不变，得到的序列；4）所示的苯甲酰甲酸脱羧酶突变体W86R‑N87T‑L109G‑L110E‑H281V‑Q282F‑A460M为将苯甲酰甲酸脱羧酶氨基酸序列的第86位的色氨酸突变为精氨酸，且将第87位的天冬酰胺突变为苏氨酸，且将第109位的亮氨酸突变为甘氨酸，且将第110位的亮氨酸突变为谷氨酸，且将第460位的丙氨酸突变为甲硫氨酸，且将第281位的组氨酸突变为缬氨酸，且将第282位的谷氨酰胺突变为苯丙氨酸，其他氨基酸残基保持不变，得到的序列。