[发明专利]一种月季微繁体系的建立方法

摘要

本发明公开了一种月季微繁体系的建立方法，该方法通过将盆栽月季经过外植体消毒、芽诱导培养、芽增殖培养、花诱导培养、生根培养五个过程，成功的将盆栽月季再生至培养瓶中培养，所述芽诱导培养过程中所用的培养基为MS+TDZ 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L+琼脂7.2g/L+蔗糖30g/L，芽增殖培养过程中所用的培养基为MS+TDZ 1.0mg/L+NAA 0.05mg/L+琼脂7.2g/L+蔗糖30g/L。该方法所培养的月季成花率与生根率较高，成活率高，具有巨大的经济价值，为后续的分子生物学研究奠定了基础。

主权项

一种月季微繁体系的建立方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：(1)月季外植体消毒：于花市购买普通月季植株，高20cm‑40cm，花色不限，参照现有方法进行消毒处理；(2)芽诱导培养：取步骤(1)消毒后的月季枝条，剪取1.5cm‑2cm单芽茎段，形态学下端接种于芽诱导培养基中，接种后培养条件为25℃，光强2000lx，光周期为16小时光照，8小时黑暗，培养30d，得无菌苗；其中，所述的芽诱导培养基为MS培养基+TDZ+NAA+琼脂+蔗糖，所述TDZ的浓度为1.0mg/L，所述NAA的浓度为0.1mg/L，所述琼脂的浓度为7.2g/L，所述蔗糖的浓度为30g/L，pH值为5.83～5.85；(3)芽增殖培养：取步骤(2)培养30d后的无菌苗，在超净工作台中将无菌苗切取为1.5cm‑2cm带节间茎段，形态学下端接种于芽增殖培养基中，每瓶均匀接种4个茎段，接种后培养条件为25℃，光强2000lx，光周期为16小时光照，8小时黑暗，培养45d；其中，所述的芽增殖培养基为MS培养基+TDZ+NAA+琼脂+蔗糖，所述TDZ的浓度为1.0mg/L，所述NAA的浓度为0.05mg/L，所述琼脂的浓度为7.2g/L，所述蔗糖的浓度为30g/L，pH值为5.83～5.85；(4)花诱导培养：(a)取步骤(3)培养45d后的无菌苗，在超净工作台中将无菌苗切取为1.5cm‑2cm带节间茎段，形态学下端接种于花芽诱导培养基中，置于智能人工气候箱中培养，获得丛生芽；(b)将步骤(a)获得的丛生芽切取为单丛，接种于芽增殖培养基中，置于人工气候箱中培养，诱导月季开花；(5)生根培养：取步骤(4)培养的月季无菌苗，在超净工作台中将无菌苗切取为1.5cm‑2cm带节间茎段，形态学下端接种生根培养基中进行培养。