[发明专利]使用切口酶的解旋酶依赖性等温扩增在审
申请号: | 201710107030.6 | 申请日: | 2011-08-16 |
公开(公告)号: | CN107012205A | 公开(公告)日: | 2017-08-04 |
发明(设计)人: | 克里斯蒂安·科夫哈格;戈尔德·格洛豪瑟;托马斯·罗特曼;拉尔夫·希默尔赖希 | 申请(专利权)人: | 凯杰有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 中原信达知识产权代理有限责任公司11219 | 代理人: | 杨青,穆德骏 |
地址: | 德国*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | 本发明涉及使用切口酶的解旋酶依赖性等温扩增。具体而言,本发明涉及用于扩增模板核酸的方法,其中所述方法包括在切口核酸内切酶存在下使用解旋酶依赖性扩增(HDA)反应扩增所述模板核酸,并且其中所述模板核酸包含由所述切口核酸内切酶识别的序列,或者在HDA反应期间由所述切口核酸内切酶识别的序列被引入到模板核酸中。本发明还涉及用于扩增核酸的试剂盒,所述试剂盒包含切口核酸内切酶、解旋酶和DNA聚合酶。 | ||
搜索关键词: | 使用 切口 解旋酶 依赖性 等温 扩增 | ||
【主权项】:
用于扩增模板核酸的非诊断性方法,其中所述方法包括在切口核酸内切酶存在下使用解旋酶依赖性扩增(HDA)反应扩增所述模板核酸,并且其中所述模板核酸包含由所述切口核酸内切酶识别的序列,或者在HDA反应期间由所述切口核酸内切酶识别的序列被引入到模板核酸中,其中HDA反应是嗜热的HDA(tHDA),其中使用包含由切口核酸内切酶识别的序列的寡核苷酸引物将由切口核酸内切酶识别的序列引入到模板核酸中,并且其中扩增的序列短于400bp,以及其中所述切口核酸内切酶是指识别完全或部分双链的核酸分子的核苷酸序列并在相对于识别序列而言的特定位置处只切割核酸分子的一条链的核酸内切酶,其中包含由切口核酸内切酶识别的序列的所述引物包含不与模板核酸杂交的5’标签序列,并且由切口核酸内切酶识别的序列处于所述标签序列中,并且其中所述方法还包括初始的热变性步骤。
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