[发明专利]一种子宫内膜干细胞规模化制备方法及其应用在审
申请号: | 201710114695.X | 申请日: | 2017-02-28 |
公开(公告)号: | CN106801034A | 公开(公告)日: | 2017-06-06 |
发明(设计)人: | 汪娟 | 申请(专利权)人: | 兰赫(上海)生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/074 | 分类号: | C12N5/074 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 201100 上海市闵行区*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明提供了一种子宫内膜干细胞规模化制备方法,包括步骤,对获得的子宫内膜组织材料进行预处理;然后加入约1‑4倍体积的消化液,消化获得单细胞悬液;并对其进行原代培养;即获得所述子宫内膜干细胞。使用本发明提供的子宫内膜干细胞的提取方法,获得的子宫内膜干细胞存活率高而且在培养过程中具有较高的增殖能力,能够对子宫内膜干细胞进行规模化的制备。 | ||
搜索关键词: | 一种 子宫 内膜 干细胞 规模化 制备 方法 及其 应用 | ||
【主权项】:
一种子宫内膜干细胞规模化制备方法,其特征在于,所述方法包括步骤:1)预处理在无菌条件下,对获得的子宫内膜组织材料,进行剪碎处理放入冰浴DMEM/F12培养基中;2)消化加入约1‑4倍体积的消化液,消化液中含胶原酶I(优选为5‑15U/ml)和胶原酶IV(优选为100‑200U/ml),37℃消化30‑90min,获得单细胞悬液;将消化好的单细胞悬液移入离心管,静置几分钟去除剩余的大块组织;离心后,基质细胞和上皮细胞存于上清液中;3)原代培养将步骤2)分离的细胞悬液接种于培养瓶中,培养基为DMEM/F12培养基,含5‑20%(v/v)胎牛血清、1%(w/v)青/链霉素,37℃、5%C02培养箱孵育,即获得所述子宫内膜干细胞。
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