[发明专利]一种植物培养方法

摘要

本发明公开了一种植物培养方法，主要包括以下步骤外植体灭菌方法、植物种子无菌萌发、种胚形态及种胚突破种皮过程观察、植物的组培快繁。本发明节省培养基成分的用量，可降低生产成本，培养时间短，提前5‑8天节省光照成本，降低培养污染率，在3%左右，常规在8%左右，因培养的培养基设加有机物，减少成苗移栽及培养基对环境的污染影响。

主权项

一种植物培养方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、外植体灭菌方法：首先用流水冲洗蒴果20‑35min，用洗衣粉水刷洗蒴果表面，用蒸馏水冲洗3‑5遍，在超净工作台上先用75%酒精消毒3‑5min，再用8%次氯酸钠溶液浸泡6‑10min，期间不停的摇动，使其消毒彻底，无菌水冲洗3‑6遍，无菌滤纸吸干表面水分待用；S2、在无菌条件下剖开蒴果，用镊子夹取蒴果外壳，将种子轻轻抖落到培养基表面；S3、植物种子无菌萌发：基本培养基采用1/2M培养基，均添加蔗糖30Ｌ和琼脂粉6.5g／L；培养基在灭菌前添加不同的生长调节剂或有机物；S4、培养基高温灭菌前调pＨ至5.5，120℃下灭菌10‑30min，加入6‑BA2+NAA0.3+30%蔗糖，置于光强1800‑2500lx，光周期16ｈ/8ｈ，温度24‑26℃的条件下培养；S5、种胚形态及种胚突破种皮过程观察：接种剩余种子在NIKON ECLIPSE 55i光学显微镜10倍物镜下观察种子胚形态和发育状况，每个蒴果观察20个视野并统计数据，以有胚率表示，结果取平均值，有胚率=（有胚的种子数/总种子数）×100%；S6、植物的组培快繁：将种子无菌萌发诱导的原球茎及叶片切割后，原球茎纵切，叶片切割长度在0.35‑0.6mm，分别接种到诱导培养基上，加入25毫升培养液，观察其诱导分化结果；S7、将幼苗培育至成熟。