[发明专利]一种采用离体叶片鉴定甘蔗梢腐病抗性的方法

摘要

本发明公开了一种采用离体叶片鉴定甘蔗梢腐病抗性的方法，包括以下步骤(1)将甘蔗梢腐病菌接种在PDA培养基平板上，25‑28℃培养3‑5天；(2)采集新鲜甘蔗叶片，清洗叶片，将叶片剪成片段，在叶片中间叶脉两侧刺伤，取甘蔗梢腐病菌的菌块接种在刺伤部位，以长有菌丝的一面贴在伤口处；(3)将接菌的甘蔗叶片置于培养皿中，喷洒无菌水，于室温条件下放置3‑5天；(4)病情调查，观察和测量病斑的长度，沿着叶脉方向测量黄色晕圈的长度，根据病斑长度对甘蔗品种的梢腐病抗性进行评价。本发明的鉴定方法，无需按照季节进行甘蔗种苗的种植，不受甘蔗苗龄和场地的限制，操作简便，重复性好，对于大量样本的筛选具有较好的省工、省时的特点。

主权项

一种采用离体叶片鉴定甘蔗梢腐病抗性的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将甘蔗梢腐病菌接种在PDA培养基平板上，25‑28℃培养3‑5天；(2)采集新鲜甘蔗叶片，清洗叶片，将叶片剪成片段，在叶片中间叶脉两侧刺伤，取甘蔗梢腐病菌的菌块接种在刺伤部位，以长有菌丝的一面贴在伤口处；(3)将接菌的甘蔗叶片置于培养皿中，喷洒无菌水，于室温条件下放置3‑5天；(4)病情调查，观察和测量病斑的长度，沿着叶脉方向测量黄色晕圈的长度，根据病斑长度对甘蔗品种梢腐病抗性进行评价，去除一个最高值和一个最低值，以剩余数值的平均值代表该甘蔗品种的抗性；甘蔗梢腐病的发病等级划分标准如下：0级：无发病症状；1级：针刺伤口处黑褐色，黄色晕圈沿叶脉方向长度≤1.0cm；2级：针刺伤口处黑褐色，黄色晕圈沿叶脉方向长度1.1‑2.0cm；3级：针刺伤口处黑褐色，黄色晕圈沿叶脉方向长度2.1‑3.0cm；4级：针刺伤口处黑褐色，黄色晕圈沿叶脉方向长度3.1‑4.0cm；5级：针刺伤口处黑褐色，黄色晕圈沿叶脉方向长度>4.0cm。