[发明专利]一种赭曲霉素A的检测方法及检测试剂盒

摘要

本发明公开一种赭曲霉素A的检测方法及检测试剂盒。本发明以赭曲霉素A的核酸适体为分子识别元件，如果待检测体系中含有赭曲霉素A时，通过赭曲霉素A的激活，形成具有催化功能的核酸，可不断循环切割底物序列，达到信号放大的目的。结合胶体金颜色变化，可实现肉眼直接观察来检测赭曲霉素A。本发明具有较高的灵敏度，对赭曲霉素A的检测限为10 pg/mL，检测具有很好的特异性，常见干扰物对检测不产生影响。本发明以胶体金为信号报告分子，检测结果直接肉眼可见，无需使用任何检测仪器，操作简单，成本低廉，适于大范围应用于基层筛查赭曲霉素A污染情况。

主权项

1.一种赭曲霉素A的检测试剂盒，其特征在于，包括以下成分：茎环结构核酸序列H1：具有A 区域、B 区域和C区域，其中A是赭曲霉素A的核酸适体，能与赭曲霉素A特异性结合；B是具有催化功能的核酸序列，C与A的部分序列互补，形成茎环结构的茎结构；底物序列H2：具有D区域、识别位点和E区域，其中识别位点的核酸为TrAG，被B识别和切割，D和E临接识别位点的区域中各有至少6个碱基与H1的B互补，D和E远离识别位点的区域至少有6个碱基互补，形成茎环结构的茎结构；F序列修饰的胶体金1：F序列与胶体金之间通过连接臂连接，F与E的一端互补；G序列修饰的胶体金2：G序列与胶体金之间通过连接臂连接，G与E的另一端互补；缓冲液：缓冲液为10 mM Tris‑HCl，pH 8.5，包括下列成分120 mM NaCl，5 mM KCl，20 mM CaCl₂和15 mM MgCl₂；茎环结构核酸序列H1：3'‑ACAGGCTACGAGGGAAATGCGGTGGGTGTGGGCTAG‑TCTCATTGTACCCACTTGGACCAATTAGCGACTATAG‑CTAGCCCAC‑5'；底物序列H2：5 '‑GCTGGACTATTCAGAGTA‑TrAG‑GATATCTAACTGAGTCCAGC‑3 '；F序列修饰的胶体金1，其核酸序列为：3'‑SH‑AAAAAA‑CTATAGATTG‑5'；G序列修饰的胶体金2，其核酸序列为：5'‑SH‑AAAAAA‑GCTGGACTCA‑3'。