[发明专利]一种基于RGD多肽修饰的超支化聚乙烯亚胺纳米探针的制备方法

摘要

本发明涉及一种基于RGD多肽修饰的超支化聚乙烯亚胺纳米探针的制备方法，包括(1)制备RGD‑PEG‑COOH；(2)制备PEI‑DTPA；(3)制备PEI‑DTPA‑mPEG；(4)制备PEI‑DTPA‑mPEG‑(PEG‑RGD)；(5)制备RGD‑Au PENPs；(6)制备RGD‑99mTc@Au PENPs。本发明制备过程简单，实验条件为常温常压；采用价廉易得的聚乙烯亚胺分子为载体，降低了材料的成本，所制备得到的SPECT/CT双模态纳米探针具有良好的生物相容性，对原位肝癌具有良好的靶向SPECT和CT成像效果，为发展新型的、廉价的多功能纳米造影剂开辟了新的思路。

主权项

一种基于RGD多肽修饰的超支化聚乙烯亚胺纳米探针的制备方法，包括：(1)在一端氨基、另一端羧基的聚乙二醇NH2‑PEG‑COOH溶液中加入6‑(马来酰亚胺基)己酸琥珀酰亚胺酯溶液中反应8‑12h，再把RGD多肽溶液逐滴加入已活化的NH2‑PEG‑COOH中，搅拌反应2‑4d，透析，冷冻干燥，即得RGD‑PEG‑COOH；(2)在PEI溶液中逐滴加入二乙烯五乙酸盐DTPA溶液，搅拌反应20‑30h透析，冷冻干燥，即得PEI‑DTPA；(3)在羧基化聚乙二醇单甲醚mPEG‑COOH溶液中加入1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐EDC·HCl溶液，室温搅拌15‑30min，然后加入N‑羟基丁二酰亚胺NHS溶液继续搅拌2‑3h，得到混合溶液；随后将混合溶液逐滴加入PEI‑DTPA溶液中，搅拌反应2‑4d，透析，冷冻干燥，即得PEI‑DTPA‑mPEG；(4)在RGD‑PEG‑COOH溶液中加入EDC·HCl溶液，室温搅拌15‑30min，然后加入NHS溶液继续搅拌2‑3h，得到混合溶液；将混合溶液逐滴加入PEI‑DTPA‑mPEG溶液中，搅拌反应2‑4d，溶液，透析，冷冻干燥，得到RGD靶向的功能化聚乙烯亚胺分子，标记为PEI‑DTPA‑mPEG‑(PEG‑RGD)；(5)在PEI‑DTPA‑mPEG‑(PEG‑RGD)水溶液中加入HAuCl4溶液搅拌15‑30min，再加入NaBH4溶液，继续搅拌2‑4h；然后加入三乙胺N(C2H5)3搅拌20‑40min，再加入乙酸酐Ac2O搅拌反应20‑30h，透析，冷冻干燥，即得RGD多肽修饰的金纳米颗粒，标记为RGD‑Au PENPs；(6)将RGD‑Au PENPs溶液中加入SnCl2溶液搅拌5‑10min，然后再加入无菌放射性高鍀酸盐溶液并混合反应5‑10min，纯化分离，得到螯合核素99mTc的金纳米颗粒，标记为RGD‑99mTc@Au PENPs，即为RGD多肽修饰的超支化聚乙烯亚胺纳米探针。