[发明专利]一种同时检测五种致病菌的引物探针组合物及多重实时荧光PCR方法有效
申请号: | 201710136218.3 | 申请日: | 2017-03-08 |
公开(公告)号: | CN106811535B | 公开(公告)日: | 2020-01-14 |
发明(设计)人: | 张鹏;宋智斌;王萌竹;官宁;张加美 | 申请(专利权)人: | 山东众合天成检验有限公司 |
主分类号: | C12Q1/689 | 分类号: | C12Q1/689;C12Q1/6851;C12Q1/14;C12Q1/10;C12Q1/04;C12R1/42;C12R1/63;C12R1/445;C12R1/01 |
代理公司: | 37241 青岛中天汇智知识产权代理有限公司 | 代理人: | 赵翠 |
地址: | 266000 山东省青岛市*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明涉及一种同时检测五种致病菌的引物探针组合物,包括表1中所示的SEQ ID No.1‑15的序列引物序列或探针序列;所述各探针序列的5’端均修饰有报告基团,3’端均修饰有淬灭基团;所述报告基团有:FAM、FITC、HEX、JOE、CY3,淬灭基团有:TAMRA,BHQ、Eclipse。本发明的一种五重实时荧光定量PCR的检测方法,可在同一反应体系中,同时检测沙门氏菌、创伤弧菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、单增李斯特菌五种致病菌。且运用五重实时荧光定量PCR法对这五种致病菌进行检测,可提高检测的灵敏度、特异性、并可大幅度的提高检测效率,弥补了常规检测所存在的步骤复杂、检测周期长,不能适应大规模快速检测的缺陷。 | ||
搜索关键词: | 一种 同时 检测 致病菌 引物 探针 组合 多重 实时 荧光 pcr 方法 | ||
【主权项】:
1.一种同时检测五种致病菌的引物探针组合物,其特征在于,包括序列表中SEQ IDNo.1-15的序列,其中SEQ ID No.1、2、4、5、7、8、10、11、13、14分别为引物序列invA-F、invA-R、vvhA-F、vvhA-R、ipaH-F、ipaH-R、nuc-F、nuc-R、prfA-F、prfA-R,SEQ ID No.3、6、9、12、15分别为探针序列invA-P、vvhA-P、ipaH-P、nuc-P、prfA-P;所述各探针序列的5’端均修饰有报告基团,3’端均修饰有淬灭基团;所述报告基团有:FAM、FITC、HEX、JOE、CY3,淬灭基团有:TAMRA,BHQ、Eclipse;所述五种致病菌为沙门氏菌、创伤弧菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌和单增李斯特菌。/n
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