[发明专利]一种利用流式细胞仪进行目的基因表达定量检测的方法在审
| 申请号： | 201710139424.X | 申请日： | 2017-03-09 |
| 公开（公告）号： | CN106979938A | 公开（公告）日： | 2017-07-25 |
| 发明（设计）人： | 周宇荀;李晓宁;王斯佳;肖君华;李凯 | 申请（专利权）人： | 东华大学 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64 |
| 代理公司： | 上海申汇专利代理有限公司31001 | 代理人： | 翁若莹,吴小丽 |
| 地址： | 200050 上*** | 国省代码： | 上海;31 |
| 权利要求书： | 暂无信息 | 说明书： | 暂无信息 |
| 摘要： | 本发明提供了一种利用流式细胞仪进行目的基因表达定量检测的方法，在表达待研究的目的基因的细胞中，敲入红色荧光蛋白基因；在目的基因的阅读框中，敲入绿色荧光蛋白基因；使红、绿色荧光蛋白基因与目的基因同时表达，但彼此独立形成各自的蛋白；所形成的能同时表达红、绿两种荧光蛋白的细胞用于对影响目的基因表达的外部因素进行筛选；用流式细胞仪定量检测细胞的绿色荧光信号的强弱，再用其红色荧光信号值进行均一化，从而对外部因素对目的基因表达的影响进行定量比较，定量检测出影响目的基因表达的外部因素。本方法能同时比较细胞在多种处理条件下，特定基因的表达量差异，在较高通量和较短时间内对基因表达的影响因素进行高灵敏度的筛选。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 利用 细胞 进行 目的 基因 表达 定量 检测 方法 | ||
【主权项】：
一种利用流式细胞仪进行目的基因表达定量检测的方法，其特征在于，步骤为：步骤1：在表达待研究的目的基因的细胞中，敲入红色荧光蛋白基因；在所述目的基因的阅读框中，敲入绿色荧光蛋白基因；使红、绿色荧光蛋白基因与所述目的基因同时表达，但彼此独立形成各自的蛋白；所形成的这种能同时表达红、绿两种荧光蛋白的细胞用于对影响目的基因表达的外部因素进行筛选；步骤2：外部因素进入步骤1所形成的细胞后，对目的基因的表达会产生上调或下调的影响，所述影响会反映在绿色荧光蛋白的表达量上；用流式细胞仪定量检测细胞的绿色荧光信号的强弱，再用其红色荧光信号值进行均一化，从而对所述外部因素对目的基因表达的影响进行定量比较，定量检测出影响目的基因表达的外部因素。
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