[发明专利]纳米免疫磁珠技术联合酶联免疫吸附快速检测鼠伤寒沙门氏菌的方法有效
| 申请号： | 201710153917.9 | 申请日： | 2017-03-15 |
| 公开（公告）号： | CN106932575B | 公开（公告）日： | 2019-12-03 |
| 发明（设计）人： | 金君华;张红星;张帅;谢远红;刘慧 | 申请（专利权）人： | 北京农学院 |
| 主分类号： | G01N33/569 | 分类号： | G01N33/569;G01N33/543 |
| 代理公司： | 11257 北京正理专利代理有限公司 | 代理人： | 赵晓丹<国际申请>=<国际公布>=<进入 |
| 地址： | 102206 北京市昌*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开一种抗鼠伤寒沙门氏菌单克隆抗体，所述单克隆抗体是由保藏编号为CGMCC No.10313的杂交瘤细胞株分泌产生。本发明还公开了由上述单克隆抗体制备得到的纳米免疫磁珠以及纳米免疫磁珠技术联合酶联免疫吸附快速检测鼠伤寒沙门氏菌的试剂盒和方法。本发明将纳米免疫磁珠分离技术与ELISA相结合检测鼠伤寒沙门氏菌的方法提高了检测灵敏度、减少了检测时间，且检测费用低、操作简单、实用性强。 | ||
| 搜索关键词： | 纳米 免疫 技术 联合 吸附 快速 检测 伤寒 沙门氏菌 方法 | ||
【主权项】：
1.一种非诊断目的纳米免疫磁珠技术联合酶联免疫吸附快速检测鼠伤寒沙门氏菌的方法，其特征在于，包括以下步骤：/n(1)取样增菌；/n(2)取增菌上清液，加入由保藏编号为CGMCC No.10313的杂交瘤细胞株分泌产生的单克隆抗体制备的纳米免疫磁珠，孵育后，磁分离，弃去上清液，浓缩重悬并热处理纳米免疫磁珠，磁分离后弃去纳米免疫磁珠，得到待测样品；其中，所述纳米免疫磁珠的加入量为每毫升增菌上清液加入0.15mg纳米免疫磁珠；所述纳米免疫磁珠中单克隆抗体与纳米磁珠的偶联质量比为3:50；/n(3)将由保藏编号为CGMCC No.10313的杂交瘤细胞株分泌产生的单克隆抗体包被到固相载体上；所述单克隆抗体的包被浓度为40μg/mL；/n(4)加待测样品：将待测样品加到步骤(3)获得的固相载体上，温育；/n(5)洗涤液洗涤；/n(6)加酶标抗体，温育；所述酶标抗体的使用浓度为200-300μg/mL；所述单克隆抗体、待测样品和酶标抗体的用量比为1:1:1；/n(7)洗涤液洗涤后，蒸馏水洗涤；/n(8)加显色液显色；/n(9)加终止液终止反应；/n(10)测定450nm处的吸光值；/n(11)计算，即可获得样品中鼠伤寒沙门氏菌浓度。/n
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