[发明专利]一种从水样粪便中收集粪类圆线虫幼虫的方法

摘要

本发明公开了一种从水样粪便中收集粪类圆线虫幼虫的方法，步骤为：将收集的大便离心收集沉淀；采用生理盐水或双蒸水混匀沉淀，离心到混合液澄清为止，再离心收集沉淀；将沉淀滴加在与烧杯直径等宽的滤纸中部，将滤纸一端固定在烧杯口上方，然后将另一端放入烧杯中；再将生理盐水或双蒸水沿烧杯壁加入至烧杯中至距离滤纸底部0.5～1cm，室温放置3～12小时，收集烧杯中的液体重复离心，保存沉淀，即得。本发明的收集方法采用了离淘滤法，可以获得没有杂质的粪类圆线虫幼虫，区别于蠕虫幼虫收集常用方法贝尔曼氏法、平皿法和Koga法方法，且可以用于这三种方法去除杂质的后续工作，方便后续DNA、RNA和蛋白质的提取等研究。

主权项

1.一种从水样粪便中收集粪类圆线虫幼虫的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)、将收集的大便于500rpm‑3000rpm离心5～10分钟，收集沉淀；(2)、采用生理盐水或双蒸水混匀步骤(1)沉淀，500rpm‑3000rpm离心5～10分钟，弃上清，重复此步骤到混合液澄清为止，再于500rpm‑3000rpm离心5～10分钟，收集沉淀；(3)、用少许生理盐水或双蒸水混匀步骤(2)沉淀，将沉淀滴加在与烧杯等宽的滤纸中部，将滤纸一端固定在烧杯口上方，另一端放入烧杯中；再将生理盐水或双蒸水沿烧杯壁加入烧杯至距离滤纸底部0.5～1cm，室温放置3～12小时，收集烧杯中的液体于500rpm‑3000rpm离心5～10分钟，收集沉淀；采用双蒸水混匀沉淀，500rpm‑3000rpm离心5～10分钟，重复此步骤2～3次，保存沉淀，即得。