[发明专利]一种金黄色葡萄球菌的检测方法及检测试剂盒

摘要

本发明公开一种金黄色葡萄球菌的检测方法及检测试剂盒。以金黄色葡萄球菌特异性的核酸适体为分子识别元件，在金黄色葡萄球菌作用下打开茎环结构DNA，进一步与胶体金纳米颗粒上的核酸相互作用，形成部分双链DNA，在核酸内切酶的作用下切割胶体金上的核酸序列，使荧光标记的一端掉落远离胶体金，从而使淬灭的荧光恢复，达到检测效果。由于工具酶的作用，可不断放大检测信号，检测方法具有较高的灵敏度，其检测限位5 cfu/mL。该检测方法具有很好的特异性，常见的其他菌对检测不产生影响。整个检测过程可在室温下完成反应，具有操作简单、经济便宜等优点，无需对菌进行裂解，可直接检测活菌。

主权项

1.一种金黄色葡萄球菌的检测试剂盒，其特征在于，包括杂交缓冲液、识别双链切割单链的核酸内切酶、猝灭荧光的纳米颗粒和下列核酸序列：核酸序列H1：依次具有A、B、C区域，其中A区域为金黄色葡萄球菌的核酸适体，C与A部分互补形成茎环结构的茎部分，A与C不互补的序列凸起于茎环结构外侧，B构成茎环结构的环部分，B中包含一段与H2的核酸内切酶识别位点互补配对的核酸序列；核酸序列H2：具有茎环结构，H2的一端修饰基团，固定在能猝灭荧光的纳米颗粒上，另一端修饰相应的荧光基团；H2的环结构上包含有一段核酸内切酶的识别位点序列，与H1的B区域的相应序列互补。