[发明专利]一种检测溶菌酶的方法

摘要

本发明提供了一种检测溶菌酶的方法，包括以下步骤：将金属有机骨架溶液滴涂到金电极表面、孵育、洗涤、氮气吹干；再将溶菌酶适体溶液滴涂到金电极表面、孵育、洗涤、氮气吹干，进行第一电化学阻抗谱检测；洗涤第一次电化学阻抗谱检测后的金电极，氮气吹干，滴涂待测样品、孵育、洗涤、氮气吹干，进行第二电化学阻抗谱检测；待测样品电阻抗图谱中的电子转移电阻减去第一次电阻抗图谱中的电子转移电阻后得到的电子转移电阻差，与预定的标准曲线，得到溶菌酶的浓度。根据本发明的实施例可知，采用本发明的检测方法操作简单，不需要标记，且灵敏度较高，检测限可达2.0×10^‑11mol/L，线性范围：1.0×10^‑7～1.0×10^‑11mol/L。

主权项

1.一种检测溶菌酶的方法，步骤如下：1)将金属有机骨架溶液滴涂到金电极表面，25～42℃孵育2～4h，水洗涤金电极表面，氮气吹干后，得到金属有机骨架修饰金电极；再将溶菌酶适体溶液滴涂到所述金属有机骨架修饰金电极表面，25～42℃孵育1～3h，再次水洗涤金电极表面，氮气吹干；以得到的溶酶体适体‑金属有机骨架修饰金电极为工作电极，采用三电极系统进行第一电化学阻抗谱检测，得到基础电阻抗图谱；2)用水洗涤所述步骤1)第一电化学阻抗谱检测后的金电极，氮气吹干，滴涂待测样品，25～42℃孵育1～3h，再次水洗涤金电极表面，氮气吹干，进行第二电化学阻抗谱检测，得到待测样品电阻抗图谱；3)根据所述待测样品电阻抗图谱中的电子转移电阻减去所述基础电阻抗图谱中的电子转移电阻后得到的电子转移电阻差，与预定的标准曲线，得到待测样品中溶菌酶的浓度，所述标准曲线为溶菌酶的浓度与电阻抗差值之间的线性曲线；所述金属有机骨架的结构如式Ⅰ所示：所述金属有机骨架的制备方法包括以下步骤：将2‑氨基对苯二甲酸溶于挥发性有机溶剂中，得到2‑氨基对苯二甲酸溶液；向所述2‑氨基对苯二甲酸溶液中逐滴加入强碱溶液，调节混合溶液的pH值为5～6；再将所述调节pH值后的混合溶液与三氯化铈混合，发生配位反应后，产生沉淀，沉淀为金属有机骨架。