[发明专利]一种高萌发率甘草无菌播种培养基筛选方法

摘要

本发明提供一种高萌发率甘草无菌播种培养基筛选方法，其通过单一变量法对甘草种子进行无菌播种培养，分析统计萌发率、褐化率和生长量，在评价当中不仅仅以成功萌发作为唯一评价标准，结合生长量作为评价标注更加符合商业工厂化的生产。

主权项

一种高萌发率甘草无菌播种培养基筛选方法，其特征在于，其包括以下步骤：步骤S10确定初步筛选范围，检索查阅相关文献资料，对比其他植物物种组培过程中添加稀土元素和酪蛋白的量并确定稀土元素和酪蛋白的初步筛选范围；步骤S20选择外植体，选择健康、生长环境一致并且生长状态相似的甘草的种子作为外植体，对外植体进行统一的消毒灭菌处理；步骤S30对照培养，使用单一变量法配制不同浓度稀土元素和酪蛋白添加量的培养基，分别接种相同量的甘草种子，并进行常规组织培养；步骤S40记录检测参数，培养7天后统计每个稀土元素浓度和酪蛋白浓度梯度中萌发的数量和褐化的数量，并计算萌发率和褐化率；步骤S50生长量计算，分别将相同浓度梯度的每个平行实验组中的幼苗取出，用清水冲洗干净，擦干表面水分并对幼苗进行称重，记录重量；步骤S60计算评估因数，将重量数值缩小10倍，再加上萌发率减去褐化率计算出评估因数，对比不同浓度梯度的评估因数，挑选出数值最大的评估因数对应的稀土元素和酪蛋白的浓度梯度；步骤S70缩小筛选范围，使用步骤S60中挑选出的浓度梯度范围重复进行步骤S10‑S60缩小筛选范围或者确定最适浓度；步骤S80反向筛选基础培养基，使用步骤S70确定的最适浓度搭配不同基础培养基，重复步骤S40和步骤S50，并使用步骤S60的计算方法计算评估因数，确定最适基础培养基。