[发明专利]提高甘草种子萌发率的无菌播种方法的筛选方法

摘要

本发明提供提高甘草种子萌发率的无菌播种方法的筛选方法，通过使用单一变量法调种子预处理操作对甘草组织培养苗的生理影响，确定最适预处理操作和操作时间，并通过确定种子预处理操作反向确定基础培养基，同时引入组培苗的生长量作为筛选标准，更加适合商业工厂化生产。

主权项

提高甘草种子萌发率的无菌播种方法的筛选方法，其特征在于，其包括以下步骤：步骤S10确定初步筛选范围，检索查阅相关文献资料，对比其他植物物种无菌播种中的种子预处理操作，确定预处理操作的初步筛选范围；步骤S20选择外植体，选择健康、生长环境一致并且生长状态相似的甘草种子作为外植体，对外植体进行统一的消毒灭菌处理；步骤S30对照培养，其以MS培养基为基础培养基，酪蛋白的浓度为0.5g/L、活性炭的浓度为0.15 mg/L、硝酸铈的浓度为3g/L，琼脂粉的浓度为10g/L、白砂糖的浓度为7g/L，配制成测试用培养基，分别接种相同量的甘草种子，并进行常规组织培养作为对照组，在常规培养的基础条件在添加进行种子预处理操作作为实验组，对照组和实验组都设置多个平行组；步骤S40记录检测参数，培养7天后统计每个实验组和对照组的萌发的数量和褐化的数量，并计算萌发率和褐化率；步骤S50生长量计算，分别将相同实验组或者对照组的甘草幼苗取出，用清水冲洗干净，擦干表面水分并对甘草幼苗进行称重，记录重量；步骤S60计算评估因数，将重量数值缩小10倍，再加上萌发率减去褐化率计算出评估因数，对比不同浓度梯度的评估因数，挑选出数值最大的评估因数对应的种子预处理操作；步骤S70缩小筛选范围，使用步骤S60中挑选出的预处理操作范围重复进行步骤S10‑S60筛选预处理操作的时间范围；步骤S80方向筛选基础培养基，使用步骤S70确定的最适预处理操作和时间搭配不同基础培养基，重复步骤S40和步骤S50，并使用步骤S60的计算方法计算评估因数，确定最适基础培养基。