[发明专利]一种促进甘草出根的组培条件的筛选方法

摘要

本发明提供一种促进甘草出根的组培条件的筛选方法，通过使用单一变量法调整测试增强光源的波长对甘草组织培养苗的生理影响，确定最适增强光源波长，并根据不同波长光源对甘草组培苗的影响，确定不同波长光源出组合，并通过保持增强光源不变反向确定基础培养基，同时引入组培苗的实际出根率作为筛选标准，更加适合商业工厂化生产。

主权项

一种促进甘草出根的组培条件的筛选方法，其特征在于，其包括以下步骤：步骤S10确定初步筛选范围，检索查阅相关文献资料，对比其他植物物种组培生根过程中添加增强光源种类并确定光源波长的初步筛选范围；步骤S20选择外植体，选择健康、生长环境一致并且生长状态相似的甘草丛生芽，将丛生芽分割成单芽；步骤S30对照培养，以1/2MS培养基为基础培养基，添加阿司匹林溶液的体积分数是为0.03%、NAA（萘乙酸）的浓度为0.05mg/L、ZT(玉米素)的浓度为2.0 mg/L、硝酸镧的浓度为3g/L，维生素B12的浓度为0.3mg/L，琼脂粉的浓度为10g/L、白砂糖的浓度为7g/L，配制成测试用培养基，分别接种相同量的甘草丛生芽，并进行常规生根组织培养作为对照组，在常规培养的基础上条件不同波段增强增强光源作为实验组，对照组和实验组都设置多个平行组；步骤S40记录检测参数，培养20天后统计每个实验组和对照组中出根的存活甘草芽的数量，并计算有效出根率；步骤S50生长量计算，分别将相同光源波长范围的每个平行实验组中的芽取出，用清水冲洗干净，擦干表面水分后对整株植株进行称重，再将根部切出，并对根部进行称重，记录重量；步骤S60计算评估因数，将有效出根率乘以根重量的十分七和植株整体重量的十分之四的和，得出评估因数，对比不同浓度梯度的评估因数，挑选出数值最大的评估因数对应的光源波长范围；步骤S70缩小筛选范围，使用步骤S60中挑选出的增强光源波长范围重复进行步骤S10‑S60缩小筛选范围或者确定最适波长范围；步骤S80反向筛选基础培养基，使用步骤S70确定的最适波长范围搭配不同基础培养基，重复步骤S40和步骤S50，并使用步骤S60的计算方法计算评估因数，确定最适基础培养基；步骤S90不同波长组合筛选，通过单一因数确定不同波长对甘草丛生芽增殖的生理参数影响，调整最适合波长组合。