[发明专利]一种提高水稻品种穗瘟室内人工接种鉴定准确性的方法

摘要

本发明属于水稻抗病育种技术领域，尤其涉及一种提高水稻品种穗瘟室内鉴定准确性的方法，步骤为：(1)育苗；(2)菌株活化；(3)诱导产孢；(4)孢子悬浮液配制；(5)喷雾接种；(6)诱发品种育苗及小区病原的培育；(7)鉴定结果调查。本发明是以室内人工接种鉴定为基础结合自然诱发鉴定的特点，通过引入诱发品种，并分期播种，使鉴定材料长期处于持续稳定致病压力之下，从而简化试验操作，不会人为对鉴定品种植株造成伤口，病原背景清晰，环境条件可调，鉴定时间安排灵活，重复性高，使大规模穗瘟室内人工鉴定成为可能。

主权项

一种提高水稻品种穗瘟室内人工接种鉴定准确性的方法，其特征在于，步骤包括：(1)育苗：根据水稻品种的数量确定试验小区大小，小区为矩形，每个品种1行，每行10株，行间距约10cm，育苗土采用稻田土，小区四周条播丽江新团黑谷作为诱发品种；(2)菌株活化：将保存的单孢菌株活化于番茄燕麦培养基的平板中，28℃黑暗培养3d～5d；(3)诱导产孢：小麦浸泡至吸水充分，用锥形瓶分装，每瓶分装小麦150g，湿热灭菌45min，自然冷却，挑取步骤(2)中菌落边缘健壮菌丝，转接至锥形瓶中，28℃黑暗培养10d，期间每24h摇动一次，使菌丝均匀生长，当菌丝布满培养基质后，将培养基质倒出用清水搓洗，去掉表面气生菌丝，沥干，平铺于洁净的浅盘中，盖上一层洁净纱布，放置于恒温光照培养箱中，黑光灯照射，温度设置为28℃，使小麦粒表面大量产生分生孢子；(4)孢子悬浮液配制：用蒸馏水配制0.05％的吐温‑80溶液，用该溶液震荡搓洗小麦粒，过滤，配制成孢子悬浮液，每个菌株配制500mL菌液；(5)喷雾接种：待秧苗长至三叶一心时，用透明塑料薄膜将小区四周隔离，隔离高度为2m，顶部用无纺布覆盖，用微型喷雾器将步骤(4)中配置好的菌液均匀喷施于小区内水稻叶片上，盖上遮阳网，20℃～30℃保温保湿3d，然后取下遮阳网；(6)诱发品种育苗及小区病原的培育：诱发品种采用丽江新团黑谷，育苗容器使用可移动的条状育苗盘，第1期诱发品种与鉴定品种同时播种，当第1期诱发品种长到三叶一心期时，播种第2期诱发品种，前一期诱发种移至外侧，后一期诱发品种置于内侧；当第2期诱发品种长到三叶一心时，播种第3期诱发品种，前两期诱发种移至外侧，第3期诱发品种置于内侧；依次类推，直至鉴定品种成熟；(7)鉴定结果调查：调查记载方法参考中华人民共和国农业行业标准《水稻品种试验稻瘟病抗性鉴定与评价技术规程NYT2646‑2014》。