[发明专利]体液悬浮细胞DNA提取试剂盒及提取方法

摘要

本发明属于生物学领域，公开了一种体液悬浮细胞DNA提取试剂盒，包括重悬液、蛋白酶K溶液、RNA酶A溶液、裂解液、沉淀剂、洗涤液A、洗涤液B和DNA溶解液，使用该剂盒提取体液悬浮细胞DNA的方法，包括以下步骤离心、沉淀重悬、添加裂解液、蛋白酶K溶液裂解，添加沉淀剂离心，添加洗涤液A，与洗涤液B离心洗涤，室温干燥后添加DNA溶解液。本发明改善了当前DNA提取方法或DNA提取试剂盒中存在的价格昂贵、使用对象单一，无法适用于体液悬浮细胞DNA的提取、提取DNA完整性较差的问题，发明了一种成本低、提取DNA浓度较高、完整性好且适用于多种体液悬浮细胞DNA提取的方法及试剂盒。

主权项

体液悬浮细胞DNA提取试剂盒，其特征在于：包括：重悬液、蛋白酶K溶液、RNA酶A溶液、裂解液、沉淀剂、洗涤液A、洗涤液B和DNA溶解液；所述重悬液选自磷酸盐缓冲液、生理盐水、Tris‑HCl缓冲溶液、添加EDTA的Tris‑HCl缓冲溶液中的一种；所述裂解液包括主裂解剂与辅助裂解剂；所述主裂解剂选自2‑8mol/L盐酸胍、2‑8mol/L硫氰酸胍、0.1‑9.9％SDS或其组合；所述辅助裂解剂为Triton‑100和/或吐温；所述的蛋白酶K溶液的浓度为10‑19mg/mL；所述沉淀剂选自3‑5mol/L的氯化钾溶液和或3‑6mol/L的硫酸铵溶液；所述洗涤液A为无水乙醇或95v/v％乙醇溶液；所述洗涤液B为71‑80v/v％乙醇溶液；所述的DNA溶解液选自去离子水、Tris‑HCl缓冲溶液、添加EDTA的Tris‑HCl缓冲溶液中的一种；所述的RNA酶A溶液的浓度为10‑30mg/mL。