[发明专利]一种具有抗肿瘤活性黑虎掌菌子实体多糖SAP及其制备方法和用途

摘要

本发明公开了一种具有抗肿瘤活性黑虎掌菌子实体多糖SAP及其制备方法和用途，所述黑虎掌菌子实体多糖SAP的分子量为1.66×10⁶Da，其单糖组成按摩尔比为木糖:甘露糖:葡萄糖＝2.4:1:12.3。本发明黑虎掌菌子实体多糖SAP对肿瘤细胞具有很强的抑制活性，尤其对宫颈癌细胞(Hela)，当达到200μg/mL时，抑制肿瘤细胞活性可达到73.66％。SAP对吞噬细胞具有明显激活作用，表现出良好的免疫活性但SAP对正常细胞没有毒性，可作为新型抗肿瘤天然多糖，该法制备活性多糖SAP活性高，提取率高可广泛应用于保健食品和医药领域。

主权项

1.一种具有抗肿瘤活性黑虎掌菌子实体多糖SAP，其特征在于：所述黑虎掌菌子实体多糖SAP的分子量为1.66×10⁶Da，其单糖组成按摩尔比为木糖:甘露糖:葡萄糖＝2.4:1:12.3；所述具有抗肿瘤活性黑虎掌菌子实体多糖SAP是通过包括如下步骤的方法提取获得：(1)将黑虎掌菌子实体粉碎，过60目筛，得粉料；(2)将所得粉料100g加入800mL蒸馏水中，80℃下浸提2‑3h，重复浸提3‑4次，合并提取液；(3)将所得提取液浓缩至100mL，加入400mL、4℃的95％乙醇，4℃静置8‑12h，5000rpm下离心，收集沉淀；(4)将步骤(3)得到的沉淀加蒸馏水溶解，然后加入等体积的Sevag试剂，搅拌2h，离心留取上清液，浓缩，透析去除小分子，冷冻干燥获得黑虎掌菌子实体粗多糖；步骤(4)中，透析时使用的为3500Da透析袋；冷冻干燥的参数为‑50℃，气压0.1mbar，时间48h；(5)将步骤(4)获得的黑虎掌菌子实体粗多糖用蒸馏水配成20mg/mL的溶液，置于琼脂糖凝胶CL‑4B层析柱，蒸馏水作为流动相，流速1.0mL/min，用苯酚‑硫酸法进行检测；合并收集的多糖，冷冻干燥，得到多糖组分SAP与SAA；步骤(5)中，冷冻干燥的参数为‑50℃，气压0.1mbar，时间48h。