[发明专利]一种用于检测发酵茶中真菌毒素的方法

摘要

本发明公开了一种用于检测发酵茶中真菌毒素的方法，将发酵茶试样经极性溶液溶、解盐析后，先后进行离心、过滤，最终置于1290/6460超高效液相色谱‑三重四极杆串联质谱仪中分析，在分析过程中采用流动相为(0.1％甲酸‑5mmol/L乙酸铵‑水)‑甲醇，且流动相A为0.1％甲酸‑5mmol/L乙酸铵‑水，流动相B为甲醇，并采用逐步提高流动相B的浓度的梯度洗脱方式进行分离，为此，使得发酵茶试样中的真菌毒素在短时间内达到基线分离，解决了发酵茶中多种真菌毒素的有效提取和测定，可同时快速地检测出多种真菌毒素，具有检测高效、环境污染小、步骤操作简便、易于推广使用的特点。

主权项

一种用于检测发酵茶中真菌毒素的方法,其特征在于包括:A、选样：选择发酵茶，并将发酵茶试样进行粉碎；B、称样：称取粉碎的发酵茶试样，并加入极性溶液和盐析剂，得混合液a，所述极性溶液为乙腈‑水溶液或者乙酸‑乙腈‑水溶液，所述盐析剂为硫酸镁、氯化钠、柠檬酸三钠和二水结晶盐、柠檬酸氢二钠合一个半水结晶盐的混合盐；E、振荡离心：将步骤B所得混合液a先后分别进行涡旋、超声提取、离心，得到上清液b；F、过滤，将上清液b置于有机滤膜中过滤，得到目标检测液；G、分析：将目标检测液置于1290/6460超高效液相色谱‑三重四极杆串联质谱仪中分析，并处理数据；所述G步骤采用流动相为(0.1％甲酸‑5mmol/L乙酸铵‑水)‑甲醇，且流动相A为0.1％甲酸‑5mmol/L乙酸铵‑水，流动相B为甲醇，采用逐步提高流动相B的浓度的梯度洗脱方式进行分离，且所述梯度洗脱方式为：0‑1.5min，90％A和10％B；1.5‑5.0min，45％A和55％B；5.0‑7.5min，10％A和90％B，7.5‑8.0min，45％A和55％B，8.0‑8.5min，90％A和10％B；所述G步骤中采用色谱柱为SB‑C18柱(2.1mm×100mm，1.8μm)，柱温：35℃；进样体积：2μL；流速：0.3mL/min；所述G步骤中离子源为鞘流电喷雾离子源，扫描方式先后按正、负离子扫描；检测方式为多反应监测；鞘气温度：310℃；鞘气流量：11L/min；喷嘴电压：500V(ESI+)/‑1000V(ESI‑)；雾化气压力：45psi；毛细管电压：4000V(ESI+)/3500V(ESI‑)；离子驻留时间：20ms。