[发明专利]一种提取I型胶原蛋白的方法

摘要

本发明涉及一种提取I型胶原蛋白的方法，该方法包括如下步骤将牛跟腱清洗干净后冷冻切片，采用75%酒精与正己烷进行消毒脱脂，进过脱杂蛋白和匀浆破碎工艺后，向匀浆液加入适量的活性酶进行酶解消化，再将上清液先后进行盐析和透析处理，将透析后的胶原原液进行冷冻干燥和真空包装得到I型胶原蛋白产品。本发明的制备工艺简单、可实现大规模生产，是一种经济有效的提取方法。本发明提取的I型胶原蛋白具有优良的生物相容性和生物活性，能够适应生物医学的应用，同时能够活化上皮细胞，促进上皮细胞增生和胶原酶生成，使皮肤紧致有弹力，在化妆品领域也具有重要的应用价值。

主权项

一种提取I型胶原蛋白的方法，其特征在于，制备方法包括以下五个步骤：步骤一： 将新鲜的牛跟腱用超纯水清洗干净，采用手术刀片剔除筋膜、碎骨、廋肉和脂肪，在‑20℃冰箱中将牛跟腱冷冻至硬化，取出后沿着组织纤维方向将牛跟腱切成1mm厚度的跟腱片；步骤二：称取适量跟腱片置于消毒脱脂溶液中浸泡，机械搅拌，采用不锈钢丝网滤去溶液，取出后用超纯水清洗若干次；步骤三：将步骤二处理后的跟腱片用碱性溶液浸泡进行脱杂蛋白，机械搅拌，间隔6~8h更换一次碱性溶液，采用不锈钢丝网滤去溶液，取出后用超纯水清洗若干次至跟腱片表面为中性（pH值为7）；步骤四：将步骤三中脱杂蛋白后的跟腱片放入绞肉机中绞碎，并将绞碎后的跟腱组织置于1000mL的酸性溶液中，采用匀浆机对其匀浆破碎若干次，每次匀浆5min；步骤五：将步骤四中的匀浆液置于大容量的不锈钢容器中，继续向匀浆液中加入1000mL酸性溶液，再向其中加入适量的活性酶，搅拌消化，离心15~30min，取上清液备用；步骤六：使用氢氧化钠溶液将步骤五中的上清液中和至溶液呈中性，加入氯化钠进行搅拌盐析，离心15~30min，沉淀即为I型胶原蛋白初品，用超纯水冲洗沉淀若干次，沥干，将沥干的沉淀溶解于透析液中，在进行透析；步骤七：将步骤六中透析后的胶原原液进行干燥处理，取出后真空封装。