[发明专利]一种经由细胞片层获得的导电细胞外基质复合薄膜及其制备方法

摘要

本发明公开了一种经由细胞片层获得的导电细胞外基质复合薄膜及其制备方法，该方法如下：主要是在可光致细胞脱附的细胞培养表面(如TiO2纳米点薄膜)上进行培养细胞，在培养的过程中加入纳米导电物质，如石墨烯纳米片、石墨烯纳米点等，这些纳米导电颗粒会被细胞内吞，导电物质分散在细胞内及细胞间，当细胞片层融合后，通过光致细胞脱附，获得一层完整的细胞片层，将其清洗后再进行脱细胞进而获得导电细胞外基质复合薄膜。本发明方法制得的导电细胞外基质复合薄膜，可应用于组织工程等领域。此外本发明的制备方法，工艺简单，易于实现，有利于进行推广应用。

主权项

一种经由细胞片层获得导电细胞外基质复合薄膜的方法，其特征在于，制备方法包括如下步骤：(a).对可见光致细胞脱附的细胞培养表面以紫外光照或蒸气消毒方式消毒；(b).将上述经处理后的表面作为体外细胞培养表面，在其表面以5×104～2×106个/cm2的密度种植细胞，加入细胞培养基，并放入37℃恒温及5％二氧化碳的细胞培养箱中培养7～15天；1～3天换液一次，在细胞脱附前1～5天加入1～100μg/mL纳米导电物质，最终在细胞培养表面上形成完整的细胞片层；(c).将经上述培养后的培养表面移入PBS中，通过波长为365nm的紫外光光照5～30min，使培养后的细胞或细胞薄层脱附，用PBS缓冲液以及去离子水对脱附后的细胞片层反复清洗；(d).将细胞片层浸泡于去离子水中，置于‑80℃冷冻30～60min，取出后在25～37℃解冻20～45min，冷冻‑解冻循环重复3～10次，之后用去离子水清洗，获得导电细胞外基质复合薄膜。