[发明专利]猪流行性腹泻病毒荧光定量PCR的引物和探针在审
申请号: | 201710200348.9 | 申请日: | 2017-03-30 |
公开(公告)号: | CN106947832A | 公开(公告)日: | 2017-07-14 |
发明(设计)人: | 张改平;王爱萍;苏运芳;刘运超;邓瑞广;邢广旭;陈玉梅;郝慧芳;王娟;杨聪聪 | 申请(专利权)人: | 河南省农业科学院;河南中泽生物工程有限公司 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 郑州大通专利商标代理有限公司41111 | 代理人: | 陈勇 |
地址: | 450002 河*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒(PEDV)经典株和变异株荧光定量PCR鉴别检测方法,该方法基于PEDV经典毒株和变异毒株的S1基因,设计了两条特异性探针,并在探针的外围设计了一对特异性引物。分别以PEDV经典毒株和变异毒株的代表毒株CV777和CH/HNLY的cDNA为模板扩增目的片段,构建重组质粒作为标准品,用于建立标准曲线,并根据两个探针的不同报告基团来鉴别检测不同毒株。该方法具有较好的特异性、灵敏性和可重复性,可用于临床样本PEDV的鉴别检测。 | ||
搜索关键词: | 流行性 腹泻 病毒 荧光 定量 pcr 引物 探针 | ||
【主权项】:
一种猪流行性腹泻病毒荧光定量PCR的引物和探针,其特征在于,所述引物的核苷酸序列为:上游引物:5’‑GCTAGTGGCGTTCATGG‑3’,下游引物:5’‑TGTAAATAAAGCTGGTAACCAC‑3’;所述探针的核苷酸序列为:探针1:5’‑TACATCGATTCTGGTCAGGGCTTTGAG‑3’,探针2:5’‑CCATATTAGAGGTGGTCATGGCTTTGAG‑3’;其中,探针1核苷酸序列的5’端结合有荧光报告基团,3’端结合有荧光淬灭基团;探针2核苷酸序列的5’端结合有荧光报告基团,3’端结合有荧光淬灭基团。
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